【FACSCelesta实验应用系列】之10色T细胞亚群的免疫分型

本文摘自微信公众号：BD生物科学

【FACSCelesta实验应用系列】之10色T细胞亚群的免疫分型

【实验概述】

本实验成功采用FACSCelesta的10色方案进行人外周血白细胞中T细胞亚群的的免疫分型，实现了一管即清楚区分Th/Ts/Treg/TEM/TCM/NaïveT/Mature T等十几个T细胞亚群，对于T细胞亚群的成熟、分化及活化等的研究起到重要作用！

 

【实验方法】

    ①/ 仪器配置

 

Flow cytometer	Laser
FACSCelesta	488nm Blue Laser   640nm Red Laser   405nm Red Laser

 

    ②/ 多色配色方案及流式试剂

 

    ● 配色方案

PE	APC-Cy7	Alexa Fluor-700	BV421	BV510	BV605	PE-CF594	PerCP-Cy5.5	BB515	BV786
CD127	CD3	CD45RA	CD25	CD8	CD4	CCR7	CD45	CD28	CD27

 

    ● 流式试剂

 

Products Name	Catalog No.	Clone	Size
BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human CD127	557938	HIL-7R-M21	0.1 mg
BD Pharmingen™ APC-Cy™7 Mouse Anti-Human CD3	557832	SK7	100T
BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 700 Mouse Anti-Human CD45RA	560673	HI100	50T
BD Horizon™ BV421 Mouse Anti-Human CD25	562442	M-A251	100T
BD Horizon™ BV510 Mouse Anti-Human CD8	563919	SK1	100T
BD Horizon™ BV605 Mouse Anti-Human CD4	562658	RPA-T4	100T
BD Horizon™ PE-CF594 Mouse Anti-Human CD197 (CCR7)	562381	150503	50T
BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Mouse Anti-Human CD45	564105	HI30	100T
BD Horizon™ BB515 Mouse Anti-Human CD28	564492	CD28.2	100T
BD Horizon™ BV786 Mouse Anti-Human CD27	563327	L128	100T
BD Pharm Lyse™ Lysing Buffer (10x )	555899		100ml

 

【实验结果】

 

如图所见，所有群体阴阳性区分明显，群体集中，即使是弱表达群体Treg也区分非常清楚，实验中使用了Diva软件的自动补偿功能，补偿准确、操作极其简单，为多色实验提供方便、快捷且精确的补偿操作。

* 本资料仅限科研用途使用

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