Luminex 究竟有多实用

 Luminex 究竟有多实用？实战案例告诉你！--R&D systems

定量检测 80 个样品的 50 种目标因子，ELISA 检测需要 50 个 96 孔板，按照大部分 R&D Systems ELISA 试剂盒 4.5 小时的操作，需要 225 个小时。计算完，我的内心是崩溃的。

直到我了解到一个新技能——Luminex 液相抗体芯片技术，只需要 1 块 96 孔板几个小时即可实现。
Luminex
「金标准 ELISA」的延伸

Luminex 液相抗体芯片技术以 R&D Systems 作为行业金标准的 ELISA 技术和成熟的 Luminex xMAP® 技术完美结合，一个孔可同时检测多达 100 种分析物，利用 96 孔板作为反应板，实现高通量的蛋白精确定量。

 

 

Fig. 1 Luminex 液相抗体芯片实验原理图

Luminex 检测原理为：将能识别不同目标分析物的微珠混合后与待检样本孵育，微珠捕获到分析物后，经由多个生物素标记的特异性检测抗体混合物识别，再与链霉亲和素-PE 荧光素结合后进行检测，PE 荧光的强度用以定量。

R&D Systems Luminex 采用与 ELISA 质量一致的抗体对筛选和缓冲液体系优化，在「金标准 ELISA」的基础上，提供最高标准和最优性能的 Luminex 多重检测试剂。

实战案例
揭示抗药机理

慢性髓细胞白血病（CML）是一种影响血液及骨髓的恶性肿瘤，伊马替尼化学疗法是治疗该疾病的最佳方式，然而约有 20% 的病人对此药物无效。Cancer Research 一文解开这一抗药性机理[1]。

研究表明，IL-33 刺激后，采用 R&D Systems Luminex 检测伊马替尼耐受 CML 病人组（CML-CP）及健康组（HD）CD34+ 细胞中 GM-CSF、IL-6、IL-8 三种细胞因子分泌，显示 IL-33 促使 CML-CP 组细胞因子分泌更高。

 

Fig.2 CML-CP 受 IL-33 刺激，细胞因子表达量增高

IL-33 和伊马替尼刺激后，IL-33 能够中和伊马替尼引起的细胞因子 GM-CSF、IL-6 分泌的降低。

 

Fig.3 IL-33 中和伊马替尼的抑制效应

IL-33 刺激后，Luminex 检测 9 种磷酸化蛋白表达，STAT5 分泌更高。

 

Fig.4 IL-33 促进 STAT5 表达增高

研究揭示了 IL-33 促进 CML 病人 CD34+ 细胞增殖和细胞因子分泌，是伊马替尼药物耐受的重要原因，它会激活 STAT5 信号通路，促进细胞增殖，因而有可能成为新的 CML 治疗靶标。

实战案例

揭示败血症感染机制

败血症是由于细菌感染，引起全身系统性炎症，导致感染性休克和器官衰竭的严重综合征，并且具有高死亡率。由革兰氏阳性细菌病原体引起的败血症目前分子机理并不明晰。

德国蒂宾根大学和美国国立卫生院（NIH）的一项研究表明[2]，酚可溶性调节肽 PSM 可使处在细菌细胞膜上的脂蛋白释放，激活免疫细胞上的 TLR2，进而促进炎症因子的释放（Fig.5）。揭示除 TLR2 外，PSM 可作为新的败血症药物靶点，通过阻断 PSM 的释放，调节脂蛋白与 TLR2 的结合，进行免疫干预。

 

Fig.5 败血症中 PSMs 释放脂蛋白

研究中，采用 R&D Systems 公司 Luminex 试剂盒检测若干种不同菌株中炎症因子 IL-8，IL-1β，IL-6 和 TNFα的表达，最终揭示上下游因子间的互作关系，阐明新型药物靶点。

除上文提到的 Luminex 液相抗体芯片检测外，多因子检测家族还有固相抗体芯片技术。多因子——单因子或单因子——多因子的转换基于不同的设计思路及研究策略，多因子检测与单因子验证是一个相辅相成的过程，R&D Systems 具有助力此类研究的整套工具。

 

参考文献：

[1] Levescot A., et al. BCR-ABL-induced deregulation of the IL-33/ST2 pathway in CD34+ progenitors from chronic myeloid leukemia patients. Cancer Res. 2014 May 15;74(10):2669-76.

[2] Dennis H., et al. Toll-like receptor 2 activation depends on lipopeptide shedding by bacterial surfactants. Nature Communication, 2016, 7: 12304.