磁珠分选策略有哪些？

小伙伴们，上面两期文章讲述了磁珠的分类、分选柱的选择，了解这些之后，我们就可以开始自己的实验了么？答案是NO，因为我们还需要考虑——针对自己的实验目的，我们该选择哪种磁珠分选策略？

美天旎磁珠分选策略分为：阳性分选、去除分选、先去除分选再阳性分选、多选分选、全血分选。好了，废话就不多说了，下面小编就带大家一一来了解下。

 

策略一：阳性分选
目的细胞被磁性标记后，作为阳性标记组分直接分选出来。
分选后的细胞不必去除MACS微珠，可立即用于培养或者后续操作。该方法可以将磁性标记的靶细胞富集10000倍。
阳性分选策略优点：纯度高，回收率高，操作迅速、简便。
 

图一：阳性分选示意图

文中部分相关产品：

货号	产品名称
130-045-101	CD4 MicroBeads, human
130-045-201	CD8 MicroBeads, human
130-049-601	CD11b MicroBeads, human, mouse
130-050-301	CD19 MicroBeads, human
130-090-512	CD141 (BDCA-3) MicroBead Kit, human

策略二：去除分选（阴选）
去除分选是把非目的细胞磁性标记后从细胞混合物中去除的方法，即未磁性标记的细胞为目的细胞。
MACS分选柱技术加上强磁性标记可以去除高达4个对数级的细胞。
去除分选策略适用范围：去除不需要的细胞；缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞)；不需要抗体和目的细胞结合，即细胞不被标记（如T细胞、B细胞、NK细胞功能分析）；复合分选的一部分。
 

图二：去除分选

文中部分相关产品：

货号	产品名称
130-110-187	Tumor Cell Isolation Kit, mouse
130-092-892	TCRγ/δ+T Cell Iso Kit, human
130-095-130	Pan T Cell Isolation Kit II, mouse
130-096-537	Pan Monocyte Isolation Kit, human
130-100-875	Pan DC Isolation Kit, mouse
130-095-813	Pan B Cell Isolation Kit, mouse
130-115-818	NK Cell Isolation Kit, mouse

策略三：先去除分选再阳性分选
细胞亚群的分选，可以先磁性标记非目的细胞，去除分选后对阴性组分再行磁性标记和阳性分选。
适用范围：在细胞悬液中，非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原，就需要先去除这群非目的细胞；如果要分选非常稀有细胞，先从细胞悬液中去除非目的细胞，在富集细胞的基础上，进行阳性分选，可获得高纯度目的细胞。
 

图三 先去除分选再阳选

文中部分相关产品：

货号	产品名称
130-091-041	CD4+ CD25+ Reg. T Cell Iso. Kit, mouse
130-092-661	CD56+CD16- NK Cell Isolation Kit, human
130-093-064	CD3+CD56+ NKT Cell Isolation Kit, human
130-094-485	CD8+CD45RA+ Effector T Cell Iso Kit, h

策略四：多重分选 
MACS多重分选是一种根据多种表面标志磁性分选细胞的技术。
多重分选中，首先用MACS多选微珠标记目的细胞，进行第一参数阳性分选。然后细胞与多选解离试剂共同孵育，后者可以将微珠从抗体上酶性解离下来。接着使用针对另一细胞表面标志的抗体-微珠复合物磁性标记阳性分选细胞。二次标记的细胞可以再次进行阳性分选或者去除分选。
 

图四：多重分选

文中部分相关产品：

货号	产品名称
130-117-033	REAlease CD56 MicroBead Kit, human
130-117-034	REAlease CD19 MicroBead Kit, human
130-117-036	REAlease CD8 MicroBead Kit, human
130-121-559	REAlease CD4 (TIL) MicroBead Kit, human
130-126-704	REAlease® CD90.1 MicroBead Kit, mouse

策略五：全血分选
从外周血中直接分选细胞，无需裂解红细胞，无需密度梯度离心，直接上柱分选。
 

图五：全血分选

文中部分相关产品：

货号	产品名称
130-090-872	Whole Blood CD45 MicroBeads, h
130-090-874	Whole Blood CD3 MicroBeads, h
130-090-875	Whole Blood CD56 MicroBeads, h
130-090-877	Whole Blood CD4 MicroBeads, human
130-090-878	Whole Blood CD8 MicroBeads

最后小编为大家献上美天旎推出的新技术产品：REAlease磁分选技术

REAlease Microbeads是一类基于重组基因工程改造抗体而研发的新型磁分选产品，使用方便，磁珠和标记的抗体片段均可灵活去除。

特点一：抗体片段化，易去除：不再使用传统抗体，而是使用REAfinity抗体片段，降低抗体与细胞的亲和能力，易解离；

特点二：抗体片段多聚化，可高效识别细胞：低亲和力的抗体片段多聚化，形成抗体片段-生物素复合体，高效结合细胞；

特点三：标记均可去除：磁珠可去除、抗体可解离，因此，根据后续实验需求，分选到的目的细胞可以仅去除磁珠只保留抗体标记，也可以同时去除磁珠和抗体，细胞表面完全不带任何标记。
 

图六：REAlease磁分选技术原理图

只需简单四步，完成REAlease磁分选
步骤1：细胞标记：细胞先后被REAlease复合体（抗体片段-生物素）和抗生物素磁珠标记
步骤2：磁性分离：阳性细胞被滞留在梯度磁场中，阴性细胞自然流穿
步骤3：磁珠去除：用REAlease Bead Release磁珠解离试剂洗脱，在洗脱目的细胞的同时，磁珠与细胞分离，获得带抗体标记的目的细胞
步骤4：抗体标记去除*：用REAlease Release试剂处理细胞，将细胞表面的抗体复合物解离。（如果您需要直接对目的细胞进行流式检测，可以省略该步骤，利用细胞表面抗体标记直接检测目的细胞）
 

图七：REAlease磁分选步骤演示图