筛选加验证，抗体芯片的正确打开方式

时间：2018-03-09 05:13:08 浏览次数：642

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Western Blotting(WB) 几乎是每个生物实验室必备的工具，但在进行多种分析物研究时，这种传统方法显得力不从心，耗时耗力，成本高昂。针对多因子进行半定量检测的高通量蛋白筛选利器——固相抗体芯片应运而生，它是基于双抗体夹心免疫分析原理，省去了繁琐的电泳、转膜过程，拥有更高的灵敏度，样本量远低于WB，实验室的配制能够实现WB分析，就可以选用固相抗体芯片产品。点击查看固相抗体芯片原理及实验操作视频（文章链接）

---------------------------------------------------------------------------举个栗子---------------------------------------------------------------------------

检测4个样品中的100个因子，WB至少需要跑100张膜，按照一张膜8个小时的操作时间计算，不眠不休需要34天；若使用固相抗体芯片，只需要4张膜，试剂盒内赠送孵育盒，4张膜可以同时操作，真正的实验操作时间仅需5.5个小时！

固相抗体芯片的灵敏度与WB相比，要高很多（>30倍），而检测相同数量的指标所需的上样量更少，甚至只有WB的1/20。

不过WB作为经典的蛋白研究手段，有其不可替代的优势。在实际使用过程中，固相抗体芯片可与WB相辅相成，实现从多因子到单因子，初步筛选到精确验证的过渡。

小编引用两篇文章，让大家感受下抗体芯片的正确打开方式，关于慢性淋巴细胞白血病肿瘤微环境的研究，文章标题：Exosomes released by chronic lymphocytic leukemia cells induce the transition of stromal cells into cancer-associated fibroblasts，作者先用R&D Systems的固相抗体芯片（货号：ARY003B）筛选磷酸激酶靶标，再使用传统实验方法去验证，研究得出chronic lymphocytic leukemia(CLL) 分泌的外泌体可以激活基质细胞相关信号通路。

在“Sunlight UV-induced skin cancer relies upon activation of the p38α signaling pathway”这篇文章中，作者先通过固相抗体芯片筛选，再由WB验证芯片的数据结果，结果显示信号通路中p38、MSK1/2、CREB在UV处理后被激活。

现在更多的科学家都在使用抗体芯片产品，R&D Systems 提供的Proteome ProfilerTM固相抗体芯片，每个样本可同时检测多达119个分析物，为确保信号的重复性及可靠性，NC膜上的每种抗体均经过验证并且设有两个平行监测点。另一点值得一提的是，R&D的芯片稳定性非常高，在可视化处理的阶段，拥有更灵活的调整曝光时间，成像出理想的实验结果。

优宁维是R&D Systems全国一级代理商，可提供高品质的抗体芯片产品，也可提供芯片实验服务，欢迎感兴趣的老师扫码咨询或预约相关讲座。

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