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ILC (Innate Lymphoid Cell ）固有免疫细胞解决方案

时间：2019-06-04 00:45:42 浏览次数：5788

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固有淋巴细胞（innate lymphoid cell, ILC）是一类缺乏抗原特异性受体的淋巴细胞，主要包括ILC1,ILC2,ILC3三个亚群，其分化谱系与T、B淋巴细胞一样，来自共同淋巴样祖细胞(CLP)，并可经由淋巴样祖细胞(αLP)、早期淋巴样前体细胞(EILP)、共同辅助淋巴样前体细胞(CHILP)、ILC前体细胞(ILCP)等发育分化为成熟的ILC细胞类群。

ILC的生物学意义：ILC细胞能够通过与周围环境中的神经细胞、上皮细胞、基质细胞、适应性免疫细胞、髓系细胞、共生菌群等相互作用，协调环境中的信号并广泛参与抗病原体感染、炎症疾病发生、器官形成及组织修复、癌症发生、代谢及生物节律等生物学过程。

ILC分化图

固有免疫细胞（ILC）均来源于ID2阳性祖细胞。ILC１产生干扰素（IFN）-γ；ILC２产生IL-5和白细胞介素（IL-13）；ILC３产生IL-17、IL-22和IFN-γ。NK需要IL-15，而其他所有ILC则需要IL-7来刺激。ILC２的分化依赖于转录因子GATA3和ROR。ILC３分化则依赖于RORT。此外，ILC３的亚群需要额外的转录因子，如芳基烃受体（AHR）来分化。NK细胞在t-bet和中胚层上皮素（eomes）作用下可分化为ILC１。ILC1的分化发育机制尚未完全阐明，但已知需要转录因子t-bet进行发育。

Reference:Immunopathology of inflammatory bowel disease

Mouse固有免疫细胞分型流式检测

指标	荧光素
LinLD	APC-Cy7
CD45	V500
CD4	PE-Cy7
CD127	BV785
TCRβ,γδ	PerCP-Cy5.5
NKp46	BV605
RORγt	BV421
GATA3	PE
T-bet	AF647
Eomes	AF488

流式检测图

Human固有免疫细胞分型流式检测

指标	荧光素
LinLD	APC-eF780
CD56	PE-CF594
CD94	Pacific Blue
CD117	BV605
CD127	FITC
NKp44	PE-Vio770
CRTH2	PerCP-eF710
GATA3	PE
RORγt	APC
Eomes	eF660
T-bet	PE

流式检测图

Reference:Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies

ILC1：ILC1S表达T-bet和IFN-γ，有助于1型炎症。

T-bet-表达的ILC1s由表达PLZF和ID2的祖细胞发展而来，IL-15可刺激其分泌细胞因子。表达RORγT的细胞也可以失去RORγT的表达，并在对IL-12信号（ex-ilc3s）的反应中获得T-bet的表达。IL-12和IL-15对表达有T-bet-RORγT的ILC或T-bet+ILC1s有刺激作用，产生在艰难梭菌、弓形虫和乙型肝炎等病原体感染期间具有保护作用的干扰素-γ（未描述：T-bet-表达的ILC，当前或以前表达的RORγT在感染期间特别重要，尽管这些ILC更像ILC3，但在肠易激综合征的情况下，它们也可能导致肠道炎症和病理。

Reference:Emerging concepts and future challenges in innate lymphoid cell biology

流式细胞术分析证实小肠RORgt - NKp46 +群体中存在ILC1亚群，可根据其表达的CD49a（由Itga1编码）和CD49d（由Itga4编码）以及CCL5产生细胞的子集进行区分。

ILC2：ILC2S在健康和疾病中的激活、调节和作用。

ILC2S可被多种刺激物激活，包括细胞因子、IL-33、TSLP、IL-25、类花生酸、PGD2和白三烯。ILC2S通过产生IL-5和IL-13在哮喘和特应性皮炎的发病机制中发挥重要作用。ILC2S的有益作用包括通过IL-13修复蠕虫迁移或病毒感染引起的粘膜组织损伤以及修复相关基因。ILC2S在生产IL-5和IL-13过程中起着重要作用。ILC2S通过将白色脂肪细胞转化为米色脂肪细胞来控制肥胖。尼古丁、干扰素、脂蛋白A和PGI2以及调节T细胞通过ICOS/ICOS-L相互作用和TGF-β抑制ILC2S。

流式细胞术分析证实ILC存在产生IL-4的亚组，其不同于产生IL-5的亚组。 IL-5产生与KLRG-1和Sca-1（由Ly6a编码）的高表达相关，而IL-4产生在KLRG-1-细胞中最高。

ILC3：ILC3在维持肠道内环境平衡和炎症性肠病发生中的作用。

巨噬细胞被细菌刺激，释放IL-1β。IL-1β与ILC3上的IL-1受体结合，促进IL-22、IL-17和GM-CSF的释放。GM-CSF触发树突状细胞和巨噬细胞生成维甲酸和IL-10，进而促进Treg细胞的形成。IL-22促进上皮屏障完整性和增殖，诱导AMPS、REG3γ和粘蛋白的产生。IL-17可以刺激中性粒细胞，也支持上皮屏障保护。表达mhcⅡ的ILC3可抑制共栖特异性CD4+T细胞。NCR-ILC3可通过IL-1β加IL-23刺激转换为NCR+ILC3。

B在IBD中，产生IL-17的NCR-ILC3的数量有所增加。IL-17可以刺激中性粒细胞。中性粒细胞迁移可破坏连接蛋白，如E-钙粘蛋白和JAML，导致上皮细胞通透性增强。上皮内ILC1和CD127+ILC1中产生IFNγ的ILC1细胞数量伴随着NCR+ILC3细胞数量的增加而大幅度减少。NCR+ILC3在IBD中产生过量的IL-22。在CD14+DCs产生的IL-12刺激下，ILC3可分化为ILC1。在CD14−DCs产生的IL-23、IL-1β和维甲酸存在下，ILC3到ILC1的转化是可逆的。产生干扰素γ的ILC1的数量增加，而NCR+ILC3细胞减少。

Reference:ILC3 function as a double-edged sword in inflflammatory bowel diseases

Characteristics of innate lymphoid cells in mice and human

Reference:ILC3 function as a double-edged sword in inflflammatory bowel diseases

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