小优博士多色实验案例#8:21色人外周血中主要淋巴细胞和骨髓亚群分析

时间:2019-06-16 16:12:32 浏览次数:3336

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淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞的一种,是体积最小的白细胞,由淋巴器官产生,是机体免疫应答功能的重要细胞成分。
淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系,按其发生迁移、表面分子和功能的不同,可分为T淋巴细胞(又名T细胞)、B淋巴细胞(又名B细胞)和自然杀伤(NK)细胞。
T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞,它们的最初来源是相同的,都来自造血组织。T淋巴细胞随血循环到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B细胞在骨髓中分化成熟。NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应,具有杀伤靶细胞的作用。

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作者最初设计该小组用于分析来自经历过alloHSCT的患者的PBMC,特别是那些参加药物研究以预防和治疗GVHD的患者。本文章基于21色panel能够同时定量单核细胞,嗜碱性粒细胞,粒细胞,树突细胞,自然杀伤细胞,B细胞以及人类外周血中所有明确定义的T细胞和T辅助细胞亚群。该小组利用其他标志物捕获NIH人类免疫学项目中描述的主要表型,可用于深度T细胞分析。作者专门设计并优化了该多色panel,用于分析来自参与临床试验的患者的1×106个新鲜或冷冻外周血单核细胞(PBMC),这些新药用于治疗异基因造血干细胞移植(alloHSCT)后的移植物抗宿主病(GVHD)。


种属

 

多色panel

SPECIFICITY FLUOROCHROME AB CLONE PURPOSE Cat.no
CD14 BUV395 MφP9 monocytes 563561
Live/Dead n/a n/a viability 565519
CD16 BUV496 3G8 monocytes 612944
HLADR BUV661 G46-6 DCs 612980
CD56 BUV737 NCAM 16.2 NKs 564447
CD38 BV421 HIT2 activation 562444
CD20 V450 L27 B cells 561164
CD4 BV510 SK3 CD4 562970
CD194/CCR4 BV605 L291H4 TH subset 562724
CD8 BV650 RPA-T8 CD8 563821
CD25 BV711 2A3 Treg 563159
CD196/CCR6 BV786 G034 TH subset 563704
CD3 AF488 UCHT1 T cells 557705
CD45RA PerCP-Cy5.5 HI100 naive/memory 563429
CD183/CXCR3 PE 1C6 TH subset 557185
CD197/CCR7 PE-CF594 150503 central/effector 562381
CD11c PE-Cy5 Bly6 mDCs 551077
CD185/CXCR5 PE-Cy7 RF8B2 TH subset 356924
CCR10 APC 3143305 TH subset 564771
CD123 AF700 32703 pDCs 306040
CD127 APC-eF780 RDR5 Treg 47-1278-42

 

流式结果图

 

逻辑分析图

 

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