小优博士多色实验案例#8:21色人外周血中主要淋巴细胞和骨髓亚群分析
时间:2019-06-16 16:12:32 浏览次数:3336
淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞的一种,是体积最小的白细胞,由淋巴器官产生,是机体免疫应答功能的重要细胞成分。
淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系,按其发生迁移、表面分子和功能的不同,可分为T淋巴细胞(又名T细胞)、B淋巴细胞(又名B细胞)和自然杀伤(NK)细胞。
T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞,它们的最初来源是相同的,都来自造血组织。T淋巴细胞随血循环到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B细胞在骨髓中分化成熟。NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应,具有杀伤靶细胞的作用。 |
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作者最初设计该小组用于分析来自经历过alloHSCT的患者的PBMC,特别是那些参加药物研究以预防和治疗GVHD的患者。本文章基于21色panel能够同时定量单核细胞,嗜碱性粒细胞,粒细胞,树突细胞,自然杀伤细胞,B细胞以及人类外周血中所有明确定义的T细胞和T辅助细胞亚群。该小组利用其他标志物捕获NIH人类免疫学项目中描述的主要表型,可用于深度T细胞分析。作者专门设计并优化了该多色panel,用于分析来自参与临床试验的患者的1×106个新鲜或冷冻外周血单核细胞(PBMC),这些新药用于治疗异基因造血干细胞移植(alloHSCT)后的移植物抗宿主病(GVHD)。
种属
多色panel
SPECIFICITY |
FLUOROCHROME |
AB CLONE |
PURPOSE |
Cat.no |
CD14 |
BUV395 |
MφP9 |
monocytes |
563561 |
Live/Dead |
n/a |
n/a |
viability |
565519 |
CD16 |
BUV496 |
3G8 |
monocytes |
612944 |
HLADR |
BUV661 |
G46-6 |
DCs |
612980 |
CD56 |
BUV737 |
NCAM 16.2 |
NKs |
564447 |
CD38 |
BV421 |
HIT2 |
activation |
562444 |
CD20 |
V450 |
L27 |
B cells |
561164 |
CD4 |
BV510 |
SK3 |
CD4 |
562970 |
CD194/CCR4 |
BV605 |
L291H4 |
TH subset |
562724 |
CD8 |
BV650 |
RPA-T8 |
CD8 |
563821 |
CD25 |
BV711 |
2A3 |
Treg |
563159 |
CD196/CCR6 |
BV786 |
G034 |
TH subset |
563704 |
CD3 |
AF488 |
UCHT1 |
T cells |
557705 |
CD45RA |
PerCP-Cy5.5 |
HI100 |
naive/memory |
563429 |
CD183/CXCR3 |
PE |
1C6 |
TH subset |
557185 |
CD197/CCR7 |
PE-CF594 |
150503 |
central/effector |
562381 |
CD11c |
PE-Cy5 |
Bly6 |
mDCs |
551077 |
CD185/CXCR5 |
PE-Cy7 |
RF8B2 |
TH subset |
356924 |
CCR10 |
APC |
3143305 |
TH subset |
564771 |
CD123 |
AF700 |
32703 |
pDCs |
306040 |
CD127 |
APC-eF780 |
RDR5 |
Treg |
47-1278-42 |
流式结果图
逻辑分析图
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