体内实验成功关键：同型对照（Isotype Controls）

体内实验成功关键：同型对照（Isotype Controls）

什么是同型对照？
同型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量的同型免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性与细胞结合而产生的假阳性干扰。同型对照即为阴性对照，其主要目的是确定一抗的结合是特异性的，而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。同型对照还可以用来竞争性的结合抗体，与功能阻断抗体发挥同样的功能。

同型对照为什么重要？
所有抗体在结构上都极其相似，只有一小部分可变区不同，决定其与抗原的特异性结合。抗体分子结构的剩余部分由保守区构成，在同型的抗体中其序列往往相同。

抗体保守区是决定抗体作用机制的关键，它能参与调控并结合各类细胞上的Fc受体。

这些细胞包括：

抗体与其他蛋白的非特异性结合受很多因素影响，其中包括：

怎样选择一个合适的同型对照？
选择合适的能与一抗特性相匹配的同型对照是成功解读实验结果的关键。选择一个合适的同型对照需要考虑其来源种属，抗体亚型，抗体偶联，轻链结构，浓度等。

与一抗来源种属，抗体亚型，抗体偶联，轻链结构，浓度相匹配是选择同型对照的关键因素。

为什么不能用PBS代替同型对照？
使用PBS代替同型对照作为对应一抗的阴性对照会呈现不理想的实验结果，尤其在药物有效性实验与免疫检测实验中，会存在多种问题：

1. PBS无法模拟大面积Fc受体参与实验体系的影响

在肿瘤抑制实验中PBS与同型对照呈现出差异表现，可能导致对实验结果的错误解读。

2. 同型对照会引起肿瘤渗透淋巴细胞（Tumor Infiltrating Lymphocyte,TIL）的水平差异

同型对照在不同癌细胞模型中对TIL的影响。在MC38模型中同型对照可诱导癌细胞产生更多TIL，但在CT-26模型中却不能。

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