蛋白纯化专题#7：亲和层析基本概念

​大家好，我是ӒKTA的小Ӓ，这周又和大家见面啦。前几周我们一起详细的学习了凝胶过滤层析的介绍，大家可以点击文章最后的链接回看之前的精彩内容哦，我们今天来看一看亲和层析吧~

亲和层析是以蛋白与层析基质上特异性的配基具有可逆的相互作用为基础的一种纯化技术。亲和层析具有很高的选择性，可以达到很高的分辨率，因此常常被用来作为蛋白纯化的首选步骤。

亲和层析在样品捕获阶段是一个理想的技术，只要感兴趣的蛋白有合适的配基，就能够使用亲和层析来进行纯化。由于亲和层析具有高选择性，因此具有高的分辨率和容量，并且对活性物质具有很高的回收率。使用亲和层析可以节省大量的纯化时间，使用更少的纯化步骤，使目标蛋白从复杂的生物混合物中纯化出来。

亲和层析纯化步骤示意图

亲和层析中常用术语解析：

♦ 基质：配基结合在基质上，基质应具有理化的惰性。

♦ 间隔臂：克服任何可能存在的空间位阻效应，改善配基和目标分子的结合。

♦ 配基：能够可逆的结合特定目标分子或者目标分子基团的分子。

♦ 结合：通过优化缓冲液条件，确保目标分子和配基分子能够有效相互作用，保证时目标分子能很好的保留在亲和介质上，而其他分子流出层析柱。

♦ 洗脱：通过改变缓冲液条件使目标分子和配基间的结合弱化，使目标分子可以离开介质并流出层析柱。

GE的亲和层析主要分为标签蛋白纯化，抗体纯化和其他亲和层析。

标签蛋白纯化

抗体纯化

今天的介绍就到这里啦，下周我们会继续详细介绍亲和层析相关知识和产品，请大家继续关注哦~