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干货!ÄKTA仪器应用和日常维护

时间:2020-12-03 16:44:47
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ÄKTA系统一直以方便易用,灵活直观的优点受到大家的喜爱,是研究生物样品如重组蛋白,抗体,疫苗,多糖的好帮手。ÄKTA仪器这么受到喜爱,那平时的保养和维护当然是少不了的啦。快来一起看看日常维护篇吧!

每次运行

使用前

• 请将溶液和样品过滤,并对溶液进行脱气处理。

• 确保泵后润洗管路中有20%乙醇。且确认在系统泵工作时,润洗液能循环流动。

• 排除泵前流路以及泵头中的空气,再开启系统泵,在柱子 By-Pass情况下确保整个系统流路中充满 buffer液体。

 

• 在柱子 By-Pass 情况下,以恒定流速运行系统泵(以最高流速的 10%~20% 运行),并确保系统反压有0.2MPa 以上。

• 检查管线接头处是否有漏液,观察系统压力是否稳定,并观察 UV 与电导基线是否正常(如果压力或 UV 不稳定,很可能系统内还有气泡,如果电导不稳定,很可能管道内原有液体还没有被完全替换)。

• 检查废液瓶是否有足够空间储存废液,并确认废液出口位于其收集瓶的液面之上,不要插入液体。

• 如果接头处漏液需要重新连接管线(Fingertight 连接时,需要将管线穿过 Fingertight,露出约 3mm。然后一只手握住管线确保管线插入到接口的底部,另一只手拧紧 Fingertight)。

• 如需使用pH计,使用前请校正。对于ÄKTA avant, ÄKTA pure,无需将pH电极拆下即可校正。

使用后

• 须用水将系统冲洗干净,之后用 20% 乙醇清洗系统及所有的管路,并保存。

• 对于 F9/F9-C 收集器,用柔软无尘纸巾擦干净收集器的 Sensor(滴同步和扫描头),如果收集器腔体内表面有冷凝水残存,也需要擦干。

• 对于 F9-R 收集器,移除收集管检查圆盘内是否有液体溅入,及时擦干。每次转动收集盘时必须先移开橡皮头。

• 将 pH 电极浸泡在保护液(pH 4 buffer 和 1 M KNO3 溶液按 1:1 体积比混合)中。对于 ÄKTA avant, ÄKTA pure,无需将 pH 电极拆下,只需从校正口注入保护液即可

• 清洁擦拭机器外表面,特别注意所有阀的阀头部分,防止试剂或结晶的盐腐蚀设备。


每周维护

• 更换泵后润洗系统的 20% 乙醇

 

• 检查系统管道是否通畅。检测方法:以一个特定流速下测量其产生的背景压力,例如 2mL/min 时的系统压力,如果压力提高比较明显(比正常情况高出 0.2MPa 以上),请首先检查在线过滤器。如果压力升高是由于在线过滤器造成的,需要更换在线过滤膜。

 

• 检查系统压力:流速为 0 ml/min 时,所有压力检测值应该显示为 0,必要时进行压力校正。

• 清洁 F9/F9-C 收集器,可以执行 Accumulate Wash 的命令,擦干净收集器的 Sensor,清理收集器内部积水。对于Pure 和 Avant 如果长期不用,可以在收集器内部放上干燥剂。

• 检查溶液入口的筛网是否很脏,必要时须更换。



每月维护

• 检查反压阀的压力是否在正常工作范围(系统运行流速 10mL/min,观察反压阀在流路中和不在流路中压力差,FR-902 的压力差约为 0.2MPa,FR-904 的压力差约为 0.4MPa),如有异常应进行清洁或者更换。

• 清洗系统流路,用 1M NaOH,执行 SystemWash 指令,之后立即用纯化水将 NaOH 冲洗干净。



每半年维护

• 用纯水检查紫外吸收,在不校零情况下, 纯水在 280nm 波长的吸收值应在 500mAU 以下,如果超过 1000mAU,提示流路池有可能污染严重,请清洁。如果清洁后没有好转,请联系 Cytiva公司。

 

• 检查 pH 的准确性,响应慢或校正斜率小于 80% 时需清洗电极,必要时需更换新的 pH 计。

本文内容整理自Cyitva公司产品手册