BIAcore产品选择及常见问题汇总
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近期,小编收到了很多关于BIAcore产品选择的问题,比如:
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为了方便大家选择,我们决定做一期产品问题大汇总!快来看一看吧!
01
仪器篇
目前市面上大家在用的仪器可以分为两类:
1、使用Classic芯片的仪器:BIAcore3000、BIAcore X100、BIAcore X100 PLUS、BIAcore X
以上型号的仪器需要搭配Classic系列传感芯片。
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2、使用Series S芯片的仪器:BIAcore 8K、BIAcore S200、BIAcore T200/T100、BIAcore4000/A100、BIAcore S51
以上型号的仪器需要搭配S系列Series S传感芯片。
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大家在查找芯片的时候,需要先确认下自己要使用的仪器型号哦。
02
芯片篇
BIAcore芯片种类非常多,要怎么选择呢?
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怎么长的都差不多啊?这怎么选?Duang~daung~duang直接上干货了~
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别看内容多,但是其实我们平时常用的主要是以下几个:
CM5:适用于蛋白质样品
CM7:适用于小分子样品(偶联量是CM5的3倍,大分子/小分子分子量比>500时必选)
SA/NA:适用于生物素标记的样品(应用链霉亲和素和生物素结合原理,不可逆;需要可逆请选择Biotin CAPture捕获试剂盒)
NTA:适合带HIS标签的样品(需配合购买NTA 试剂盒,货号28995043)
ProteinA/G:即用型,适用于抗体
维护芯片:Biacore待机状态使用维护芯片,针对于仪器脱盐,除菌等仪器维护工作
我们的芯片都是有一片装、三片装和十片装可以单独购买。
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03
试剂(盒)篇
一、偶联试剂盒
1、氨基偶联试剂盒:适用于偶联含有氨基的配体,可以使用50次以上(货号BR100050)
2、巯基偶联试剂盒:适用于偶联含有巯基的配体,可以偶联50次以上(货号BR1000557)
3、醋酸钠:搭配偶联试剂盒使用,偶联缓冲溶液(PH4.0/4.5/5.0/5.5)
二、捕获试剂盒
1、HIS捕获试剂盒:捕获含有His标签的融合蛋白(货号28995056)
2、GST捕获试剂盒:捕获含有GST标签的融合蛋白(货号BR100223)
3、Biotin捕获试剂盒:搭配特殊的CAP传感芯片(包含在试剂盒中),可以实现生物素化配体的可逆捕获。(Classic系列货号28920233,S系列货号28920234)
3、鼠抗捕获试剂盒:捕获鼠抗IgG抗体(货号BR100838)
4、人抗捕获试剂盒:捕获人抗IgG抗体(货号BR100839)
5、人Fab片段捕获试剂盒:捕获人源Fab片段(货号28958325)
三、再生试剂
盐酸甘氨酸:用于芯片再生,包含不同PH(PH1.5/2.0/2.5/3.0)
四、维护试剂盒
对仪器进行清洗维护(适用BIAcore 8K货号29229054,适用BIAcore T200,S200货号29394519,适用BIAcore X100,3000货号29394521,适用BIAcore C货号29394522)
五、缓冲试剂
1、HBS-EP+ 10x (货号:BR100669)
成分:0.1M HEPES pH7.4,1.5M NaCl,30 mM EDTA,0.5% (v/v) Surfactant P20
2、HBS-P+ 10x (货号:BR100671)
成分:0.1M HEPES pH7.4,1.5M NaCl,0.5% (v/v) Surfactant
3、HBS-N+ 10x (货号:BR100670)
成分:0.1M HEPES pH7.4,1.5M NaCl
(区别在于有无EDTA和Surfactant P20,HBS-EP+ x10最常用)
PBS 10x (货号:BR100672)
成分:0.1M 磷酸盐,27mM KCl,1.37M NaCl
PBS-P 10x(货号:28995084)
成分:0.2M 磷酸盐,27mM Kcl, 1.37M Nacl,0.5% 表面活性剂P20
(区别在于有无Surfactant P20)
04
BIAcore常见问题汇总
1、BIAcore实验相关试剂可以自己配吗?
答:不建议自己配制。可能因为过滤不好或者PH不准的原因而影响实验结果。特别是不同PH的醋酸钠和盐酸甘氨酸,不建议自己配制,可能配的PH不准。如果您自己配制试剂,需要预先过滤和超声除气泡。
2、BIAcore芯片是否能重复使用?
答:CM5芯片是可以重复使用的。其他芯片根据情况。偶联在芯片上的蛋白A是不能去掉的,样品蛋白B是可以脱离芯片的(再生的过程)。理论上芯片都是可以反复再生的,但是具体多少次和配体蛋白也有关系。
3、BIAcore芯片使用过后怎么保存?
答:
1. 干法保存(将芯片塞进50ml离心管,密闭后直接存于4度)
2. 半湿法保存(芯片金膜条从卡槽推出,在金膜凹槽内滴加20~50 ul运行缓冲液,保证金膜浸润,随后插回芯片卡槽,存于4度,仅限一周;可重复滴加运行缓冲液,避免金膜表面干涸,延长保存时间)
3.湿法保存(将芯片塞进50ml离心管,往离心管里加入适量运行缓冲液,确保离心管平放时缓冲液没过金膜;长时间存于4度)
PS:已固定配体的芯片的保存时间,取决于配体活性的保存条件和保持时间
4、芯片可以偶联几种样品?
答案:由机型通道和实验目的决定;Biacore T100/T200/S200/3000:4通道,最多偶联3种不同样品;Biacore X100/X100 Plus:2通道,最多偶联1种样品;Biacore 8K 16通道,最多偶联8种不同样品;
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