好消息!PCR困难户的福音!
时间:2021-09-26 20:50:52 浏览次数:323
PCR技术又称为聚合酶链式反应,是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术,被广泛应用于基础研究、疾病诊断、农业检测和法医调查等领域。
PCR技术原理
PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:
①变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,双链DNA解旋成为单链;
②退火:温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③延伸:DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶的作用下,沿着模板链将引物3’端进行延伸。重复循环变性-退火-延伸三过程(25-35次)模板DNA的含量可扩大100万倍以上。
PCR扩增目的片段经常会遇到时间太长、操作繁琐、特异性差、退火温度摸索过程麻烦等问题。
现在,QIAGEN AllTaq系列PCR试剂的出现,不仅极大简化了实验流程,更加实现了我们对PCR实验的期望,正如其名字一样,一款试剂满足所有PCR实验的需求。
1.超快速扩增
一般DNA聚合酶的延伸速度为每分钟1kb。而AllTaq在扩增低于1kb片段时,只需10秒即可快速完成延伸,将通常2个小时的PCR时间有效缩短至45分钟!
2.无需实验条件优化
不同目标片段、不同退火温度、不同模板量、双重扩增,AllTaq一个Protocol都能实现!
3.室温配置反应体系
AllTaq系列PCR试剂利用小分子锁扣(Guard molecular)将DNA聚合酶与抗体紧密结合,只有通过95度高温2分钟才能开启小分子锁扣,激活DNA聚合酶活性。我们严格的热启动可防止引物二聚体的形成和扩展非特异性产物的延伸。无需冰上配置,配置后的反应体系更可在室温下保存3天也不影响PCR实验结果。
4.示踪染料识别方便
AllTaq还贴心考虑到实验操作的便捷性,提供黄蓝两色惰性染料,黄色染料用于DNA模板示踪,蓝色染料用于酶反应液示踪。当反应混合正确时,体系颜色变为绿色,避免加样误差。在PCR反应凝胶电泳过程中,合体的指示剂又分身成为50bp和4000bp电泳指示带。
5.超高灵敏检测度
AllTaq可高灵敏的检测到低至单个拷贝,从43个含单拷贝的样本中检出42个样本,成功率高达97.7%!
订购指南
单细胞样本制备及文库构建 | 说明 | 货号 |
REPLI-g Single Cell Kit (24) | 用于单个细胞进行全基因组扩增(WGA) | 150343 |
REPLI-g Single Cell Kit (96) | 150345 | |
REPLI-g WTA Single Cell Kit (24) | 用于对单个细胞进行全转录组扩增(WTA) | 150063 |
REPLI-g WTA Single Cell Kit (96) | 150065 | |
REPLI-g Cell WGA & WTA Kit (12) | 用于对少量样本同时进行全基因组和全转录组扩增 | 150052 |
REPLI-g Cell WGA & WTA Kit (48) | 150054 | |
QIAseq FX Single Cell DNA Lib. Kit (24) | 用于单细胞全基因组扩增、片段化、建库一体化试剂盒 | 180713 |
QIAseq FX Single Cell DNA Lib. Kit (96) | 180715 | |
QIAseq FX Single Cell RNA Lib. Kit (24) | 用于单细胞全转录组扩增、片段化、建库一体化试剂盒 | 180733 |
QIAseq FX Single Cell RNA Lib. Kit (96) | 180735 |
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