BD Rhapsody 单细胞分析系统

基于BD Rhapsody平台，实现高通量单细胞分选和单细胞mRNA建库，主要原理依据微孔法，实现高通量的单个细胞及无偏差3’端- mRNA捕获、扩增和检测，完成高效的mRNA反转录和扩增后进行高通量测序，结合高通量测序平台，实现单细胞基因表达研究，细胞类型解析，及细胞异质化研究等。
 
一 技术原理

基于BD Rhapsody平台的高通量单细胞RNA-Seq是结合微孔板技术，利用自然沉降的原理分离单细胞，将带有CL（Cell Label）、UMI（Unique Molecular Index，分子标签）、Poly-dT的磁珠与单细胞混合，从而实现大规模的单细胞mRNA捕获，以用于后续的文库构建。
 
二 实验流程

首先，将单细胞悬液加入BD Rhapsody™ cartridge（微孔板）中，通过随机分布和重力沉淀实现单细胞捕获；接下来，加入过量的磁珠加入到cartridge（微孔板）中，尽量使每个微孔中都有一个磁珠，以保证每个细胞都与一个磁珠配对；随后，随着细胞在微孔中裂解，mRNA分子被磁珠上的Oligo（寡核苷酸片段）捕获后，磁珠从微孔板中被收集到一个单独的试管中，用于随后的cDNA合成、文库构建。
 
两种产品模式实验流程如下：