做基因沉默的你,还没听说过我GapmeR的大名么?
时间:2022-04-30 11:53:12 浏览次数:135
做基因沉默的你,还没听说过我GapmeR的大名么?
我的全称叫Antisense LNA GapmeRs,是一类能高效抑制mRNA和lncRNA功能的反义寡核苷酸,一般长14-16个核苷酸,并且全部被硫代磷酸化,可通过细胞膜表面受体介导进入细胞中发挥功能。大家常请我出马用于mRNA和lncRNA的功能分析。
大家都说和我siRNA算是亲兄弟关系,但是我们不一样哦。
不来虚的,一切看成分,咳咳,是原理,我可是正儿八经的原理党。
上图是我的工作原理图,简单来说我GapmeR与靶片段结合之后,会自然的招募体内的RNase H,从而把靶RNA降解,这条GapmeR恢复单身继续去结合其他相同的靶片段,并且细胞核内也存在RNase H,所以我是knockdown核内的lncRNA的优秀工具哦!
路人:噢!原来GapmeR这么不专一啊
GapmeR:冤枉!!我跑来跑去都是针对我的靶序列片段啊,无论它在核内核外,甚至在活体内,上山下海,我都会把它找到,然后降解.....
关于如何使用我,今天先浅浅的展示一下吧
上海交通大学第九人民医院的老师们使用我去沉默一个新型lncRNA转录本RBAT1,验证它加速疾病发生的机制。
使用流程:
(1)准备密度60-80%的细胞,转染试剂、终浓度20-50nM的GapmeR,侵染细胞后,48-96h收集细胞。
(2)qPCR验证细胞中RBAT1成功knockdown后,进行体内沉默。
(3)使用肿瘤小鼠模型,每3天静脉注射15mg/kgGapmeR或对照GapmeR,(无需使用转染试剂)持续长达30天,共计8次。然后对小鼠实施安乐死,取出肿瘤眼球,进行下游分析。
很简单是不是,我GapmeR也是有多面性的哦
(均为PS骨架,且3’或5’端可选择带有FAM修饰)
1.Product:Antisense LNA GapmeR Standard
Cat. no.339511(5nmoL)、339512(15nmoL)适用于标准细胞系对多种设计进行初始测试。
2. Product:Antisense LNA GapmeR Premium
Cat. no.339517(5nmoL)、339518(15nmoL)HPLC纯化,适用于用于细胞层面分析
3. Product:Antisense LNA GapmeR in vivo Ready
Cat. no.339523(5nmoL)、339524(15nmoL)HPLC纯化,脱盐纯化,活体实验的前期细胞试验。以及B细胞,原代细胞系,悬浮细胞等难转染细胞使用
4. Product:Antisense LNA GapmeR in vivo Large Scale
Cat. no.339532 5mg-1kg规模,用于活体实验
我的亮相时间暂时就到这里啦,请大家为我打call吧!只要呼声够高,我一定会返场的!
请大家记住我:GapmeR哦
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