如何用安捷伦2100生物分析仪进行食品验证

正所谓民以食为天，食品安全问题妥妥的就是民生问题。我们目前市面上有更多食品特别是果汁都标榜了采用特定水果做原料，但是不知道看文章的你有没有想过这些食品中是否真的用到了标签中特定水果，还是说根本不含或者含量很少，甚至是挂羊头买狗头，在原料中换成了别的低成本的水果。今天小编鲁大师就用覆盆子和草莓举例，给大家分享一下如何用安捷伦2100生物分析仪结合微卫星标记（Microsatellite markers）进行食品验证。

水果简介
覆盘子是蔷薇科悬钩子属的木本植物，果实是聚合果，最常见的是红色，也被称为树莓，味道酸甜可口。除了直接吃之外，这个水果还可以制作饮料和果茶，干燥之后也是一味中药，主要功效是固肾养肝明目，可以治疗阳痿早泄。

草莓是蔷薇科草莓属的多年生草本植物。我们看到的草莓“果实”其实是一个“聚合大果”。草莓可使用部分是由花托发育而来，而粉色果肉的一点点白色芝麻状的才是草莓真正的果实。草莓营养价值丰富，被誉为是“水果皇后”，含有丰富的维生素C、维生素A、维生素E、维生素PP、花青素等营养物质。尤其是所含的维生素C，其含量比苹果、葡萄都高7-10倍。

实验概述

采用安捷伦2100生物分析仪微电泳系统区分草莓和树莓果实DNA。这种方法利用了微卫星标记，可以根据PCR产物的存在/缺失或大小分化来区分草莓和树莓DNA，使用生物分析仪配套DNA1000 芯片（货号：5067-1504）进行测量。

微卫星标记Microsatellite markers

微卫星标记是一种特异引物PCR为基础的分子标记技术，这是一类由几个核苷酸（一般为1~6个）为重复单位组成的长达几十个核苷酸的串联重复序列。每个标记两侧的序列一般是相对保守的单拷贝序列。由于微卫星标记种属特异性较强，因此经常被运用于植物的鉴定。在本次实验中运用到的是标记是Fvi11和Fvi20

Fvi11是基于一个(GA)16重复基序，在草莓品种被证实可以提供长度约为137bp的扩增子，但在草莓不同品种之间的扩增子大小上会表现出多态性。 但是Fvi11不会覆盆子发生交叉反应，因此不会出现扩增子。
Fvi20是基于一个(GA)20个简单序列重复基序序列，已被证明在草莓品种中扩增出一个单一或多个长度约162bp的条带，但与覆盆子(Rubus)品种只会出现一个扩增子。这两者结合，可以作为鉴别两者的依据。

实验结果
结果表明（图1），Fvi11在含有草莓(a和C)的样品中，其扩增子约为122bp。在282和290bp处也观察到额外的扩增子，符合实验预期。 Fvi11与含有覆盆子(B和D)的样品没有交叉反应。阴性对照显示未检测到扩增。此外，实验又检测了商业草莓，Fvi11显示了阳性结果，并在相同的122bp片段，可以断定该草莓酱确实含有真草莓(图2)，因此证明本实验该方法也适用于验证含有水果的加工食品样品

 
图 1 Fvi11胶图（草莓和覆盆子样本）

图 2 安捷伦2100生物分析仪Fvi11检测电泳图

在Fvi20实验中，草莓样本(A和C)中，得到了在144、162和/或175bp左右的单个或多个扩增子（图3）。在这一次检测中，144-bp的片段存在且占优势，而其他条带的出现的可重复性较低。将Fvi20标记位点应用于含有覆盆子样品中(B和D)的显示在136bp左右处存在一条单条带，非常的容易和草莓品种144bp的扩增子特征区分开来（图3 和图4）。同样的，Fvi20也应用于检测市面上销售的草莓酱样品中，显示了143和161bp左右的条带，表明改草莓酱样本中确实具有草莓DNA的特征。

图 3 Fvi20胶图 （草莓和覆盆子样本）

图 4 安捷伦2100生物分析仪Fvi20检测覆盘子电泳图

总结
利用植物的微卫星标记作为区别草莓和覆盆子的依据，采用PCR多DNA进行扩增，用安捷伦2100生物分析仪进行了验证。这个验证方法不仅适用于鉴别新鲜水果，一样适用于鉴别用水果作为原料的加工食品。

本次实验中用到的安捷伦2100生物分析仪配套DNA1000检测试剂盒等产品现在有折扣哦，有DNA验证和质控需求的小伙伴千万不要错过哦！ 今天科普就到这里啦！青山不改，绿水长流！我们下周再见！