大肠杆菌基因敲除文库限时促销

转眼又到开学季，小刀准备了一款文库产品为大家的科研助助力——大肠杆菌基因敲除文库。

众所周知，大肠杆菌具有取材广泛，分裂增殖能力强、发育周期短及结构简单等特点，已作为一种重要的模式生物在分子遗传学、生物工程领域发挥重要的作用。

大肠杆菌基因敲除文库（OEC4988）简介：
1）由日本科研机构（Advanced Biosciences, Keio University (Japan), Nara Institute of Science and Technology (Japan)）和普度大学合作研发
2）涵盖3985个基因，每个基因提供2个独立的缺失菌株，共计7970个克隆
3）靶向基因均被卡那霉素抗性盒取代，盒侧翼带有可被FLP重组酶识别并切除的FRT位点
4）菌株背景：E. coli K-12 BW25113

文库具体信息：
1.    背景菌株E. coli K-12 BW25113来源 

doi:10.1038/msb4100050

2.    文库内基因覆盖度
1）研发时共靶向4288个基因
2）303个未成功缺失：均为必需基因，包括37个未知功能基因
3）3985个成功缺失：3912个基因在MG1655和W3110均有注释，73个基因在之前的研究中有注释
4）3912 K-12 ORF缺失：2157个明确基因，1755个未知功能基因

doi:10.1038/msb4100050

3.    文库整体研发流程——基于λ-Red同源重组系统
1）基因敲除引物设计：全长~70nt，20nt部分靶向pKD13卡那霉素抗性框，50nt部分靶向基因序列
2）Red重组酶辅助质粒：pKD46，在L-阿拉伯糖作用下，表达γ、β和Exo蛋白，促进同源重组发生
3）卡那霉素抗性筛选重组菌
4）PCR验证：设计卡那霉素抗性序列引物和位点特异性引物分别进行验证

4.    文献应用解析
 
作者使用OEC4988进行全基因组筛选，发现9个基因敲除大肠杆菌株能够激活线虫的天然免疫。在这9个基因中，blc基因在许多临床病原体中展示了独特的SNP，炎症性肠病中大多数大肠杆菌为blc a251，而blc g251显著减少，从而促进肠道炎症的发生和发展。

作者挑选文库中230个和电子传递链、ATP合酶、转运体相关的基因缺失株进行筛选，最终得到7个氧化还原酶相关的基因缺失株在经TDZ处理后，细胞膜的通透性会大大降低。后续他们又在E. coli  MG1655中分别缺失这7个基因进行验证，结果证明吩噻嗪类药物确实是会抑制细胞能量代谢，影响细胞膜完整性。

限时促销：

货号	品名	规格
OEC4988	E. coli Keio Knockout	1套
OEC5042	E. coli Keio Knockout Parent Strain BW25113	1株