【罗工流式秘籍77】血清和血浆样本的区别、制备和保存

在日常实验中，血液是大家经常会收集的实验样本，除了检测其中的血细胞或免疫细胞。也会检测一些可溶性细胞因子或者免疫球蛋白等等重要成分，需要收集血液中的血清或血浆。

 

两者究竟有啥区别呢？

   

 

血清/血浆制备方法

 

血清：

1. 收集全血于不含抗凝剂or含促凝剂的血液收集管中；

2. 室温让样本自然凝血30-60 min，期间不能摇晃或震动；

3. 4℃，2500~3000 rpm离心10 min（小鼠样本转速建议减小，2000rpm左右）；

4. 上清即为血清，将上清转移至新的EP管中；

制备完成后，如不需要立即进行实验，应于4℃或冰上进行分装后保存于-20或-80℃冰箱，避免反复冻融。

 

血浆：

血浆的制备步骤是类似的，只不过收集管为抗凝管，血液不会发生凝集，颠倒混匀后，直接从第三步往后做就可以啦~

注意：血样采集后1h之内进行处理

 

血清/血浆的保存

长期保存-80℃，1-2个月内保存-20℃，1周内保存 4℃

 

*实际上随着时间推移细胞因子都会逐渐降解，少数因子会出现升高现象

推荐-80℃ 3-6个月，-20℃ 15~30天，4℃ 24~48 h

*血清结冰时体积会增加约10%，冻存前，注意预留一定体积空间

 

血清/血浆的解冻方法

-80℃→-20℃→4℃→常温，逐步解冻。

速溶法不推荐，容易造成蛋白凝集，出现沉淀。

*解冻后高速离心，剧烈震荡，涡旋，等操作均会一定程度降解细胞因子！

 

 

 

有时候制备血清/血浆是为了检测一些细胞因子、趋化因子等等，而从前实验室中最常见的传统检测方法就是ELISA了，很多同学面对着96孔板可能会头大，且每检测一种因子就要用掉好多血清样本。

别慌，CBA技术拯救你，只要你拥有一台最低配置4色流式仪，就可以在低至25-50 μl血清或血浆样本中检测多种因子。

 

什么？CBA不是中国男篮吗（划掉），此CBA非彼CBA噢~

CBA（Cytometric Beads Array）是一种利用流式方法学，对液相样本中的多重蛋白进行定量检测的技术。

简单来说，就是利用不同APC荧光强度的微球结合标记区分各种不同的待测因子，再利用双抗夹心法，靠PE检测抗体，对各个因子进行表达量强度的检测。

哇！这听起来就是一个高通量的ELISA~

选择困难患者？不知该检测什么细胞因子或趋化因子？我们有多种经典且经过验证的CBA kit，多种经典因子套餐，总有一款是你的菜。

 

	货号	品名	包含指标	规格	检测浓度范围
小鼠	551287	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Thl/Th2 Cytokine Kit	IL-2,IL-4,IL-5,IFN-yJNF	80 Tests	20-5,000 pg/mL
	560485	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Thl/Th2/Thl7 Cytokine Kr	IL-2,IL-4, IL-6,IFN-v,TNF,IL-17A,IL-10	80 Tests	20-5,000 pg/mL
	552364	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Inflammation Kit	IL-6,IL-10,MCP-1, IFN-v.TNF, IL-12p70	80 Tests	20-5,000 pg/mL
	550026	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Immunoglobulin Isotyping	lgEJgM,lgA,lgG3JgG2b,lgG2a,lgGl	100 Tests	10 ng/ml-0.5 mg/ml (主要 用于定性)
人	550749	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2 Cytokine Kit	IL-2JL-4,IL-5, IL-10, TNF, IFN-y	80 Tests	20-5,000 pg/mL
	551809	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2 Cytokine Kit II	IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF,IFN-y	80 Tests	20-5,000 pg/mL
	560484	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2/Thl7 Kit	IL-2, IL-4,IL-6, IL-10, TNF, IFN-y, IL-17A	80 Tests	20-5,000 pg/mL
	551811	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Inflammatory Cytokine Kit	IL-8, IL-lp, IL-6, IL-10, TNF, IL-12p70	80 Tests	20-5,000 pg/mL
	552990	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Chemokine Kit	CXCL8/IL-8, RANTES CCL5/RANTES,CXCL9/MIG,CCL2/MCP-1, CXCL10/IP-10	80 Tests	10-2,500 pg/mL
	561418	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Anaphylatoxin Kit	C3a, C4a, C5a	80 Tests	C3d&C4d : 10-2,500 pg/mL C5a: 4-1000pg/mL
灵长类	557800	BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Non-human Primate Thl/Th2 Cyt	IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,TNFJFN-gamma	80 Tests	20-5,000 pg/mL

除此以外，我们还有CBA Flex set可以让大家根据自己的需求定制专属套装，同时检测的因子指标高达30种噢！