【罗工流式宝典第15式】mouse常见研究样本类型中巨噬细胞标志物的选择

巨噬细胞是造血系统中最具可塑性的细胞，存在于所有组织中，并显示出巨大的功能多样性。它们在发育、体内平衡、组织修复和免疫中发挥作用。目前，巨噬细胞已经成为许多人类疾病的重要治疗靶点，所以认识到巨噬细胞的多样性是至关重要的。

 

组织驻留巨噬细胞是在大多数器官中发现的一个多样化的细胞家族，如大脑小胶质细胞、肝脏Kupffer细胞和肺泡巨噬细胞。对于各脏器中的巨噬细胞的研究，人的样本很难获取，因此小鼠模型就是最佳的研究对象。在小鼠各脏器中巨噬细胞的异质性，导致在做免疫相关的流式研究时，选择的标志物或染色结果图会出现差异。

 

下面给大家介绍一些小鼠不同研究样本中的巨噬细胞标志物及图例。

 

1. 小鼠血液

在小鼠血液中，巨噬细胞也可以叫做Ly-6Clow单核细胞，含量较少，一般用CD11b+、F4/80+作为检测标志物。

 

2. 小鼠骨髓

巨噬细胞也一般用CD11b+、F4/80+作为检测标志物。

 

3. 小鼠肝脏组织

小鼠肝脏中有两类巨噬细胞，一类叫做kupffer细胞，用F4/80 hi CD11b low进行鉴定。另一类叫单核细胞衍生的巨噬细胞，用F4/80 low CD11b hi进行鉴定。

 

4. 小鼠肺组织

小鼠肺中也有两类巨噬细胞，分为肺泡巨噬细胞（Alveolar macrophages）和肺间质巨噬细胞（Interstitial macrophages），可以用CD64+MerTK+圈出肺巨噬细胞，再通过CD11b和CD11c区分肺泡和肺间质巨噬细胞，且有利于在一个panel中同时做巨噬和DC的区分（不做详细划分巨噬细胞类型，也可用CD11b和F4/80marker检测）。后面还可以增加，CD11C，CD206和MHCⅡ做进一步分型。

 

图例1

 

 

5. 小鼠中枢神经系统

小鼠中枢神经系统存在多种巨噬细胞，有小（神经）胶质细胞（CD11b+CD45lowF4/80+）和单核细胞衍生的巨噬细胞（CD11b+CD45hi）。

单核细胞衍生的巨噬细胞继续细分的话，包括：

血管周围巨噬细胞（CD11b+CD45hiF4/80+CD163+CD206+）

脑膜巨噬细胞（CD11b+CD45hiF4/80+CD163-CD206+）

脉络从巨噬细胞（CD11b+CD45hiCD163-MHCIIhi）

 

6. 小鼠脾脏组织

巨噬细胞也一般用CD11blow、F4/80+作为检测标志物，也可用CD11blow、CD64+作为检测标志物,还特征性表达MerTK，CD68。脾脏里的巨噬细胞细分的话，还可以分为红髓和白髓巨噬细胞、边缘区巨噬细胞 (MZM) 和边缘区嗜金属巨噬细胞 (MMM)，具有高度异质性。用酶消化法，而不是传统的机械研磨，可以显着改善这些巨噬细胞亚群的分离，特别是 MZM （CD11bhighF4/80med Tim4high

）和 MMM（CD11bhighF4/80medTim4med）

 

 

7. 小鼠肠道组织

肠道组织里，很多老师都会研究DC细胞，但是DC细胞的标志物CD11C，MHCII在肠道巨噬细胞中也会有表达，老师们在检测和数据分析圈门时要注意哦。

 

8. 小鼠皮肤组织

除了CD11B，F4/80marker外，可添加EPCAM，CD64，CD24等标志物，用于对巨噬细胞进行更详细的划分。

 

9. 小鼠肾脏组织

肾脏中，单核细胞/巨噬细胞群定义为 CD11b+和Ly6Chigh、Ly6Cintermediate(int)或Ly6Clow。所有三个群体都以低水平存在于正常肾脏中。在炎症模型中，会随着炎症程度的改变，逐渐改变。

 

 

10. 小鼠睾丸组织

 

11. 脂肪组织

小鼠脂肪组织巨噬细胞同样可以用CD11b+、F4/80+作为标志物，但是F4/80mid群包含嗜酸性粒细胞 (Siglec-F+) 和中性粒细胞(GR1+)，因此，圈门的时候要十分小心，只要圈下图中1门的位置，进一步可以通过CD11c+和CD301+/CD206+去区分M1和M2。

 

 

下表位对上述检测样本进行的汇总，便于供大家查阅：

 

上述内容涉及到的部分相关组织样本制备，可以查看如下文章：（可点击查看）

样本	文章
脾脏	【罗工流式宝典第1式】小鼠Treg细胞的鉴定、分离及体外抑制实验
肾脏，主动脉	【罗工流式宝典第2式】小鼠高血压模型（主动脉、肾脏组织）中Th细胞的鉴定
淋巴结	【罗工流式宝典第3式】小鼠淋巴结Th17细胞体外诱导分化及鉴定
骨髓	【罗工流式宝典第4式】小鼠骨髓来源树突细胞的获取，体外诱导及相关功能评价
皮肤	【罗工流式宝典第5式】从人和小鼠的皮肤组织制备单细胞悬液

 

更多组织：   

https://www.univ-bio.com/worthington.html

 

 

下表为我司验证过的，小鼠的巨噬细胞检测常备现货的骨架panel，有需要的小伙伴们欢迎询价，打包选购更优惠哦！

	指标	荧光素	货号	规格
Mouse macrophage	CD45	FITC	553079	lOOug
	CDllb	Pcrcp-cy5.5	550993	lOOug
	F4/80	BV421	565411	50ug
	CD86	PE-CY7	560582	50ug
	CD206	AF647	565250	25ug
	Fc block		553141	lOOug

 

参考文献：

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