mRNA合成全流程产品解决方案

新型冠状病毒感染（coronavirus disease 2019，COVID-19）疫情暴发以来，各个国家采取了多种控制措施，但仍造成了大量的感染和死亡病例。世界卫生组织（World Health Organization，WHO）统计数据显示，截至2023年2月3日，全球COVID-19累计确诊病例7.54亿例，死亡病例达到681万例。目前，虽然我国已经解除对COVID-19采取的甲类传染病管控措施，但是新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2，新冠病毒）仍然在变异，重复感染的风险仍然存在。疫苗接种和抗病毒药物的使用是控制传染病的有效手段。而疫苗被认为是全球战胜新型冠状病毒疫情的最终希望。自COVID-19疫情爆发以来，灭活疫苗、重组蛋白亚单位疫苗、病毒载体疫苗、DNA载体疫苗和mRNA疫苗等五大技术路线的过百个疫苗研发项目在全球紧急启动。mRNA疫苗相比于其他类型的疫苗，具有安全性高、生产成本低、生产周期短，能更好满足全球疫情对疫苗剂量的迫切需求以及易于开发针对变异病毒株新疫苗等优势，已在全球掀起了研发高潮。据不完全统计，我国大约有16款mRNA新冠疫苗在研。疫情退去，后续上市的疫苗还能获得多大的商业化价值尚未可知，但布局mRNA疫苗是一个入场mRNA疗法这一新兴领域的重要步骤。

 

mRNA疫苗/药物的工作机制清晰，经由脂质纳米颗粒包裹的mRNA进入体内后被细胞所摄取，纳米脂质颗粒在胞内解开后释放出mRNA，随后利用体内的氨基酸进行自然的蛋白翻译，从而发挥其药物/疫苗功能。mRNA的体外合成制备、保持稳定性和细胞内递送是mRNA药物/疫苗研发的关键技术。

图1 mRNA疫苗/药物原理

 

其中合成LNP包裹的mRNA流程大致经过模板制备、体外转录、纯化和载体包裹等环节：

图2 LNP-mRNA合成流程

图3 mRNA合成产品总览（酶法加帽法）

 

一、模板制备：

货号	产品名称	规格
abs60251	重组高热稳定DNA 聚合酶	1000U
abs44058811	dNTP Mix (25 mM each)	250ul
abs60036	2×Taq PCR Mix	1ml*50
abs60034	2× Xerox PCR Master Mix	1ml×5
abs60056	2×Pfu Master Mix	1ml×5
abs60055	2×Pfu Master Mix（Quick Load）	1ml×5
abs60084	T4 DNA Ligase	500U×10
abs60250	快速多片段DNA组装预混液	50T
abs60024	无内毒素高纯度质粒大量快速提取试剂盒	10T
abs60023	无内毒素高纯度质粒小量快速提取试剂盒	50T
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二、体外转录：

分类	货号	产品名称	规格
酶产品	abs60153	T7 RNA 聚合酶	1000KU
	abs60170	无机焦磷酸酶	100KU
	abs60172	脱氧核糖核酸酶Ⅰ（DNase Ⅰ）	10000U
	abs60249	重组表达的鼠源RNase抑制剂	10000U
	abs60150	RNA酶抑制剂	40000U
核苷酸原料	abs60159	ATP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
	abs60163	CTP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
	abs60164	GTP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
	abs60165	UTP Sodium salt solution（100mM）	1ml×3
修饰碱基	abs60155	假尿苷三磷酸四钠盐溶液	1ml
	abs60156	N1-甲基-假尿苷三磷酸四钠盐溶液	1ml
	abs60168	5-甲基-CTP钠盐溶液	1ml
	abs60169	5-甲氧基-UTP钠盐溶液	1ml
	abs60185	假尿苷三磷酸四锂盐溶液	50ul
	abs60186	N1-甲基-假尿苷三磷酸四锂盐溶液	50ul
	abs60187	N6-甲基-ATP锂盐溶液	50ul
	abs60188	5-甲基-CTP锂盐溶液	50ul
	abs60189	5-甲氧基-UTP锂盐溶液	50ul

 

三、RNA加帽（酶法加帽法）

分类	货号	产品名称	规格
酶产品	abs60153	T7 RNA 聚合酶	1000KU
	abs60166	2 氧甲基转移酶	50000U
	abs60152	牛痘病毒加帽酶	10000KU
合成帽结构	abs60182	Abs Cap AG	100ul
	abs60183	Abs Cap GG	100ul
	abs60184	Abs Cap AU	100ul
	abs60318	Abs Cap m6AG	10ul
	abs60319	Abs Cap2 AG	10ul
	abs60320	Abs Cap2 m6AG	10ul
	abs60321	体内天然帽结构类似物组合	1kit

 

四、RNA纯化及检测

分类	货号	产品名称	规格
RNA纯化	abs9259	无酶无菌水（DEPC水）	500ml
	abs7992	Oligo(dT)18磁珠（1um）	1ml
	abs7986	羧基磁珠（1um）	10ml
双链RNA 检测	abs590002	双链RNA（dsRNA）ELISA检测试剂盒（K1）	96T

 

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备注：所有工具RNA均使用 Cap AG结构共转录加帽，修饰碱基5种可任选其一（5-Methoxy-UTP，5-Methyl-CTP，N1-Methylpseudo-UTP，N6-Methyl-ATP，Pseudo-UTP。）

 

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