BD流式细胞术临床应用研究-皮肤科

皮肤病是皮肤（包括毛发和甲）受到内外因素的影响后，其形态、结构和功能均发生变化，产生病理过程，并相应的产生各种临床先后表现。皮肤病的发病率很高，多比较轻，常不影响健康，但少数较重甚至可以危及生命。常见的皮肤病有牛皮癣，疱疹，硬皮病，湿疹，较严重的皮肤相关疾病包括皮肤T细胞淋巴瘤，系统性红斑狼疮，多发性肌炎和皮肌炎，银屑病及部分性病等等。

皮肤感染，是细菌和真菌感染性皮肤病，病情患者有轻有重，轻的易治疗，严重的不易治疗。常见的皮肤感染是金黄色葡萄球菌感染，临床上表现为皮肤疖痈、坏疽、蜂窝组织炎、毛囊炎等。真菌感染包括各种皮肤鲜菌病和皮肤黏膜念珠菌病。

一、淋巴细胞亚群检测

淋巴细胞是机体细胞免疫和体液免疫应答功能的重要细胞成分。利用流式细胞术分析淋巴细胞亚群水平，可以帮助评价机体免疫状态，是目前广泛应用于临床各领域的重要检查指标。

机体正常情况下，各种淋巴细胞亚群（T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞）保持一定的数量和比例，相互作用，稳定调节，维持着机体正常的免疫功能。当不同的淋巴细胞亚群的量及功能发生异常改变时，机体就会产生一系列的病理变化及免疫功能失调，导致疾病的发生。测定人类淋巴细胞亚群的变化，对早期发现和控制疾病，指导临床治疗，评估机体免疫状态都有着非常重要意义。

在临床上，外周血淋巴亚群分析已广泛用于许多疾病的辅助诊断，如HIV感染、抑制免疫检测、原发或获得性免疫缺陷病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、造血系统疾病、变态反应性疾病、呼吸及消化系统疾病等，对于分析发病机制，观察治疗疗效及监测预后有着重要的临床意义。

检测目的：分析外周血淋巴细胞亚群，了解患者免疫功能的异常改变，辅助临床诊断和治疗

检测指标：CD19，CD27，lgD，CD4，CD8，Foxp3，CD3，CD16，CD56，CD28

临床意义：1）监测病程，对红斑狼疮（SLE）患者而言，将CD27+lgM+lgD+B 淋巴细胞亚群的的水平作为一个指标，可提示患者病情严重程度，给临床治疗有效参考；

2）辅助治疗，对红斑狼疮（SLE）患者而言，通过监测CD4+Foxp3+T 淋巴细胞水平的上调与否，确定间充质干细胞（MSC）移植的疗效；

3）作为诊断活动期与缓解期SLE患者的一项有价值的参考指标

4）CD8+CD28-抑制性T淋巴细胞作为指标，随时跟踪皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL）患者的病程，给予临床治疗参考。

应用举例：推荐产品及货号

CAT NO.	DESCRIPTION	SIZE
345788/341113/349209	CD19 FITC/PE-Cy7/PE	50 Tests
340425/340424	CD27 PE/FITC	50 Tests
340031	BD SimultestTM CD8/CD28	50 Tests

二、细胞因子检测

Th细胞（CD4+T细胞亚群）根据自身所分泌的细胞因子，分为Th1和Th2两个亚群。Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ和TNF-β等细胞因子，主要介导细胞免疫反应，在诱发器官特异性自身免疫病，器官移植排斥反应和抗感染免疫中起着重要的免疫调节作用。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13，主要调节体液免疫反应，在诱发过敏反应中起着决定性作用。

Th1/Th2亚群及其相互之间的平衡在免疫应答的调节中起着关键的作用，因此Th1/Th2平衡的失调与多种疾病的发生、发展和预后有着密切的关系，是很多疾病的发生的根源和恶化的动力。

流式细胞术检测细胞因子，多用于风湿免疫科（类风湿性关节炎）、呼吸科（过敏性哮喘）、皮肤科（过敏性皮炎）、感染科（胞内外感染）、肿瘤科、器官移植（危排/耐受）。

检测目的：检测免疫状态，观察疾病进程，判断预后，辅助诊断

检测指标：IL4/IFN-γ，IL-2，TNF-α

临床意义：1）辅助疾病治疗，通过调节细胞因子的平衡状态来调节免疫应答；

2）检测疾病治疗和预后，通过对病情的实时监测，给临床治疗提供参考。

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应用举例：推荐产品及货号

CAT NO.	DESCRIPTION	SIZE
347344	CD3-PerCP	100 Tests
340584	CD8-APC	100 Tests
340456	BD Fastalmmune TM IFN-γ/IL-4	50 Tests
341652	CD69-PE	50 Tests

三、CD64检测

CD64是能识别免疫球蛋白、对IgG单体具有高亲和力、介导体液免疫和细胞免疫、对感染性疾病具有早期诊断价值的IgG Fc片段1（FcγR1）。正常情况下，CD64主要表达于巨噬细胞、单核细胞及树突状细胞表面，中性粒细胞表面几乎不表达CD64。当机体患感染性疾病时，中性粒细胞表面CD64表达迅速升高。

CD64作为感染性疾病良好的诊断标准，在临床上具有广泛的应用前景，对于多种呼吸系统感染性疾病的早期诊断具有重要意义。

检测目的：感染性皮肤病的早期诊断

检测指标：CD64

临床意义：1）高敏感、高特异的诊断感染性疾病的早期标志物；

2）区分感染性炎症和活动性自身免疫性疾病；

3）监测抗菌药物疗效并预测术后感染

4）鉴别细菌感染性疾病和病毒感染性疾病

应用举例：推荐产品及货号

CAT NO.	DESCRIPTION	SIZE
340768	BD Quantibrite TM CD64 PE/CD45 PerCP	50 Tests
341124	BD Oncomar TM CD14 FITC/CD64 PE	50 Tests

四、细胞周期及倍体分析

正常人体细胞的DNA含量是二倍体，细胞群体具有特定的增值比例，而肿瘤细胞会产生特异的DNA含量增殖，通过检测细胞的DNA含量和增殖比例，可以了解细胞群体的倍体性和增殖能力。具体操作时，先将实体组织制备成单细胞悬液，用固定剂或去污剂在细胞膜上打孔，使DNA特异的荧光染料如PI（碘化丙啶）导入细胞核，PI和DNA碱基对特异结合后上机检测PI的荧光强度，并进行数据分析。

检测目的：判断皮肤癌患者的肿瘤细胞增殖状态

检测指标：S期细胞比率，DNA倍体

临床意义：1）了解细胞群体的倍体性和增殖能力

通过核酸染料标记DNA，并由流式细胞仪进行分析，可以得到细胞各个时期的分布状态，计算出G0/G1%，S%及G2/M%，了解细胞的增殖能力。在肿瘤病理学研究中，通常以S期细胞比率作为判断肿瘤细胞增殖状态的指标。

2）用于皮肤癌的早期诊断，跟踪随访和早期治疗，例如，可检测皮肤癌前病变发生早期的重要指标；提示形态学表现良好的肿瘤有恶性转变的可能；反应肿瘤细胞增殖状态，并可作为判断预后的指标。

应用举例：推荐产品及货号

CAT NO.	DESCRIPTION	SIZE
340242	CycleTEST PLUS DNA Reagent Kit（DNA检测试剂盒）	40 Tests
349523	DNA QC Particles	25 Tests