流式细胞术可以检测的常用转录因子

细胞功能和分化全部由调节基因表达的细胞内转录因子控制。由于这些因子通常是蛋白质，因此可以针对蛋白某些特定表位的抗体来检测它们。这样，转录因子的检测本质上与检测细胞表面的蛋白质没有区别。然而，由于感兴趣的蛋白质位于细胞内，可能在细胞质中，亚细胞结构内或者是细胞核中，因此固定和破胞膜、核膜、质膜是必须的。现在不少研究生还是习惯用Western Blot去检测此类蛋白表达，实际上，流式可以检测不少转录因子，既节省了时间，又可以获得更为客观的定量结果。

下表中列出了流式细胞术可检测的常见转录因子及表达细胞和胞内定位，供大家参考：

（以下信息整理自流式中文网）

流式细胞术可以检测的常用转录因子
转录因子	细胞类型	细胞内位置
AHR	肝细胞、Treg、Th17	胞浆
Aiolos	B、T、NK细胞	核内
AIRE	树突状细胞、淋巴结、淋巴基质细胞、单核细胞	核周区域？？
BATF	B、T细胞	核内
Bcl-6	B细胞和CD4+滤泡辅助T、记忆T细胞	核内
β Catenin	一些非免疫组织、T细胞、B细胞、造血干细胞	胞浆/核内
Blimp1	B、T、树突状细胞和一些NK细胞	胞浆
c-Maf	神经、眼、造血系统	核内
c-Rel	Treg、成熟T细胞	胞浆、核内
E4BP4	NK、NKT、树突状细胞	核内
Egr1	B、T、粒细胞	胞浆/核内
Egr2	B、T、NKT细胞	胞浆/核内
Eomesodermin/TBR2	NK和T细胞	核内
Eos	T细胞和神经系统	跨膜
FoxJ	纤毛上皮细胞、初始B和T细胞	核内
FoxP3	CD4+ CD25+ 调节T细胞、CD4+ CD25-细胞	胞浆/核内
Gata-3	中枢神经系统、肾脏、乳腺、皮肤、T细胞	核内
Helios/IKZF2	T细胞、造血干细胞	核内
IkB-zeta	巨噬细胞、单核细胞、B细胞、T细胞	核内
IRF4	巨噬细胞、B细胞、T细胞	胞浆/核内
Nanog	胚泡、胚胎干细胞和胚胎生殖细胞	核内
NFkB	几乎所有细胞	胞浆/核内
NFAT	T细胞	胞浆/核内/跨膜
Notch 1	胸腺细胞、骨髓干细胞、T细胞、NK细胞	胞浆/高尔基体/核内/跨膜
Notch 2	活化外周T细胞、骨髓、胸腺细胞	胞浆/高尔基体/核内/跨膜
Notch 3	中枢神经系统、一些胸腺细胞、血管平滑肌细胞、T细胞	胞浆/高尔基体/核内/跨膜
Notch 4	CD8+脾树突状细胞、内皮细胞、巨噬细胞	胞浆/高尔基体/核内/跨膜
Nurr77	胸腺细胞和T细胞	胞浆/核内
OCT3/4	胚胎干细胞、诱导多能干细胞	核内
Pax5	造血细胞、B细胞	核内
PLZF	CD4+和CD8+T细胞、gamma/delta T细胞和NK细胞	胞浆/核内
RORΥ	心脏、肝脏、肾脏、肺、肌肉、CD4+CD8+胸腺细胞	核内
Runx1/AML1	造血细胞、粒细胞、B、T细胞	胞浆/核内
SOX2	胚胎干细胞和神经细胞	胞浆/核内
T-bet	B细胞和CD4+T细胞	核内
ThPOK	造血细胞、皮肤、心脏、平滑肌、肝脏、固有NK细胞、gamma/delta T细胞	核内
TOX	胸腺细胞、T细胞、NK细胞、淋巴组织诱导细胞（LTi）	核内

问题1：以上指标的流式抗体哪里有提供？

回答：优宁维代理的抗体品牌中有专业老牌的流式抗体供应商BD Pharmingen；

有Cell Signaling Tech，提供较多的信号通路流式抗体；

有R&D公司，提供较多的趋化因子、趋化相关的流式抗体；

有Serotec公司，提供较多的药物分析、畜牧相关的流式抗体；

以上所有品牌的流式抗体可以进入到FCM.univ-bio.com来查询。

问题2：流式检测转录因子和细胞表面染色有何区别？

区别1：核内转录因子多为低表达，需要使用染色指数较高的荧光素，即比较亮的荧光素。

区别2：:核内转录因子在加入流式抗体前，需要做固定和破膜处理。同时还要注意和表面marker的兼容性哦。

产品名称	规格
Transcription Factor Buffer Set Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer	100T
Transcription Factor Buffer Set Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer	25T

比如FOXP3的染色步骤处理如下：

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