流式应用精选--细胞线粒体膜电位变化的检测 —— JC-1

一．实验概述：

       JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电位 Ψm 的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1 聚集在线粒体的基质中，形成聚合物 (J-aggregates)，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1 不能聚集在线粒体的基质中，此时 JC-1 为单体 (monomer)，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。 

       线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标，细胞凋亡时，线粒体膜电位发生去极化，膜电位降低，JC-1 以单体形式存在显示绿色荧光。

二 . 实验方法：

1. 仪器配置

Flow cytometer	Laser
BD FACSCelestaTM	488nm Blue Laser

2. 流式试剂

Products Name	Catalog No.	Size
BD Pharmingen™ BD™ MitoScreen (JC-1)	551302	100 Test

三.实验结果

Untreated Jurkat	8uM Camptothecin 6h

          JC-1（Green）阳性代表凋亡细胞，JC-1（Red）阳性代表正常细胞，从图可见，未处理的 control Jurkat 细胞中处于凋亡状态的细胞比例为 10.9%，正常细胞 87.6%，经过 8uM Camptothecin 处理 6hr 后，细胞凋亡比例明显增加至 58.4%，正常细胞比例下降至 39.4%，两群细胞分群非常明显，数据清晰，体现出 JC-1 试剂的有效好用和仪器优异的检测能力，同时实际操作过程也非常简单便捷（只需将 JC-1 染料加入细胞中孵育 20min 即可检测）。

46 *   编者：BD生物科学售前技术支持 钱璟