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NK细胞全面解决方案

时间：2019-05-25 03:31:34 浏览次数：4178

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NK细胞是固有免疫的一部分，介导对病毒，寄生虫，细菌和肿瘤细胞的反应。通过其表面受体FcγRIIIA (CD16)参与固有免疫和适应性免疫应答。

一、

NK细胞分化和发育、分型

1、multiple sites for nK-cell development

2、Developmental origin of human natural killer (NK) cells

3、Developmental origin of murine natural killer (NK) cells in the bone marrow (BM)

二、

NK细胞的功能

1、Natural killer (NK) cells in health and disease NK细胞和疾病的关系

2、NK细胞相关的细胞因子功能

3、NK细胞与B细胞、T细胞、DC、巨噬细胞如何作用共同针对肿瘤、病原体

4、NK cells and immune responses to tumour cells

三、

NK细胞的胞内信号通路

1、NK cell receptor

2、NK cell effector signaling pathways

3、Co-stimulatory molecules that regulate NK-cell

四、

NK细胞Workflow

1、NK细胞分选纯化

用途	货号	产品名称	规格
全血分选	130-090-875	StraightFrom™ Whole Blood CD56 MicroBeads human	Kit
阳性分选	130-050-401	CD56 MicroBeads, human	2mL
无柱式分选	130-098-185	MACSxpress®Whole Blood NK Cell Isolation Kit human	Kit

2、NK细胞体外扩增培养

NK细胞活化/扩增试剂盒中，含有负载CD2和CD335（NKp46）抗体的抗生物素MACSiBead TM颗粒，PBMC或分离的NK细胞在该颗粒的存在下可以培养长达20天。

NK细胞刺激扩增结果图

相关产品推荐：

用途	货号	产品名称	规格
NK细胞刺激扩增	130-094-483	NK Cell Activation/Expansion Kit，human	Kit
NK细胞培养基	130-114-429	NK MACS Medium	500mL

3、ADCC抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用

抗体通过与靶细胞表面抗原特异性结合，招募如自然杀伤（Natural killer, NK）细胞等效应细胞杀死靶细胞。NK细胞表面表达FcγRIIIa蛋白，是一种抗体Fc区域的受体，能识别并结合抗体的Fc端，从而使NK细胞结合到靶细胞周围。一旦Fc受体与抗体的Fc区域结合，NK细胞就会释放细胞因子和细胞毒性颗粒，进入靶细胞触发细胞凋亡。

4、流式多色分型检测

Panel 1：Functional Analysis of Human Natural Killer Cells

指标	荧光	克隆号	目的
Live Dead	Aqua	n/a	活性
CD3	Apc-Cy7	SP34-2	排除
CD4	Apc-H7	SK3
CD14	TRI-COLOR（PE-Cy5）	TuK4
CD19	TRI-COLOR（PE-Cy5）	SJ25-C1
CD16	Pacific Blue	3G8	NK细胞
CD56	PE-Cy7	NCAM16.2
CD107a	FITC	H4A3	脱粒
IFN-γ	BV711	4S.B3	功能
TNF-α	BV605	Mab11
Perforin	PE	B-D48
Granzyme B	PE CF594	GB11
CD8	BV785	RPA-T8
Eomesodermin	PERCP eflour 710	Dan11mag	转录因子
CD57	APC	HCD57	分化

Panel 2：Multicolor flow cytometric analysis of NK cells from mouse spleen

激光	指标	荧光素	克隆号
紫激光	CD11b	VioBlue	REA592
紫激光	CD11b	Viobility 405/520 Fixable Dye	REA592
蓝激光	CD335	FITC	REA815
	Anti-KLRG1	PE	REA1016
	CD3	PE-Vio615	REA606
	CD19	PE-Vio615	REA749
	Anti-NK1.1	PE-Vio770	PK136
红激光	CD27	APC	REA499
红激光	CD45	APC-Vio770	REA737

5、NK相关的细胞因子检测

reference ：

1:Nicholas D. Huntington, Christian A. J. Vosshenrich and James P. Di Santo (2007) Developmental pathways that generate natural-killer-cell diversity in mice and humans NaTURe RevIeWS Immunology

2: Alex M. , Chao Yang. Monica S.(2008) Functions of natural killer cells NATURE IMMUNOLOGY VOLUME 9

3: Eric V* Jacques A. Nune (2004) Natural Killer Cell Signaling Pathways SCIENCE VOL 306 26