小优博士多色实验案例#8：21色人外周血中主要淋巴细胞和骨髓亚群分析

淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞的一种，是体积最小的白细胞，由淋巴器官产生，是机体免疫应答功能的重要细胞成分。
淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系，按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T淋巴细胞（又名T细胞）、B淋巴细胞（又名B细胞）和自然杀伤(NK)细胞。
T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞，它们的最初来源是相同的，都来自造血组织。T淋巴细胞随血循环到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B细胞在骨髓中分化成熟。NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应，具有杀伤靶细胞的作用。

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作者最初设计该小组用于分析来自经历过alloHSCT的患者的PBMC，特别是那些参加药物研究以预防和治疗GVHD的患者。本文章基于21色panel能够同时定量单核细胞，嗜碱性粒细胞，粒细胞，树突细胞，自然杀伤细胞，B细胞以及人类外周血中所有明确定义的T细胞和T辅助细胞亚群。该小组利用其他标志物捕获NIH人类免疫学项目中描述的主要表型，可用于深度T细胞分析。作者专门设计并优化了该多色panel，用于分析来自参与临床试验的患者的1×106个新鲜或冷冻外周血单核细胞（PBMC），这些新药用于治疗异基因造血干细胞移植（alloHSCT）后的移植物抗宿主病（GVHD）。

种属

多色panel

SPECIFICITY	FLUOROCHROME	AB CLONE	PURPOSE	Cat.no
CD14	BUV395	MφP9	monocytes	563561
Live/Dead	n/a	n/a	viability	565519
CD16	BUV496	3G8	monocytes	612944
HLADR	BUV661	G46-6	DCs	612980
CD56	BUV737	NCAM 16.2	NKs	564447
CD38	BV421	HIT2	activation	562444
CD20	V450	L27	B cells	561164
CD4	BV510	SK3	CD4	562970
CD194/CCR4	BV605	L291H4	TH subset	562724
CD8	BV650	RPA-T8	CD8	563821
CD25	BV711	2A3	Treg	563159
CD196/CCR6	BV786	G034	TH subset	563704
CD3	AF488	UCHT1	T cells	557705
CD45RA	PerCP-Cy5.5	HI100	naive/memory	563429
CD183/CXCR3	PE	1C6	TH subset	557185
CD197/CCR7	PE-CF594	150503	central/effector	562381
CD11c	PE-Cy5	Bly6	mDCs	551077
CD185/CXCR5	PE-Cy7	RF8B2	TH subset	356924
CCR10	APC	3143305	TH subset	564771
CD123	AF700	32703	pDCs	306040
CD127	APC-eF780	RDR5	Treg	47-1278-42