为了阐明类风湿性关节炎（RA）停药后疾病发作的过程，日本东邦大学风湿病科率先关注预测达到严格缓解标准后的RA再发作。2014年11月至2018年1月，在日本东京医疗中心，RA患者在3个月内保持简化疾病活动指数 ≤ 3.3 ≥ 3个月，符合条件。主要终点是停药后2年内的情况（疾病活动评分28 - 血沉率 ≥ 3.2，较基线增加 >0.6）。

 

 

每2-3个月进行一次全面的临床评估、40个关节的超声检查和12个MSD生物标志物的血液取样，持续2年，除非患者出现眩晕。细胞因子和可溶性细胞因子受体血浆浓度的测定。在测量前，将血浆储存在−80°C。用MSD超灵敏试剂盒（Meso Scale Discovery）通过电化学发光法测定白细胞介素IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、干扰素-γ、TNF、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、血管内皮生长因子、sTNFR1、sTNFR2和可溶性IL-6受体。

 

36名患者（80.6%女性，中位病程5.2年；停用药物的中位疗程2年；中位缓解期18个月）入选。20名患者（55.6%）在第一次停药日后43-651（中位数115）天出现RA发作。两名无疾病发作的患者被排除在比较之外。临床和超声评估未显示组间差异显著；Kaplan–Meier分析显示，较高的可溶性肿瘤坏死因子受体1（sTNFR1）基线浓度影响随后的疾病发作（p = 0.0041）。

 

较高的基线白细胞介素IL-2浓度仅对sTNFR1水平较低的患者有利（p = 0.0058），导致83.3%的sTNFR1水平较低且IL-2水平较高的患者维持病情缓解。该研究证明了联合生物标志物在预测类风湿关节炎停药后持续缓解的有效性。

 

这是第一个从临床、影像学和生物标志物的角度综合评价达到ACR/EULAR定义的临床缓解患者的研究。结果表明，结合生物标志物（而非临床和影像学）评估对于预测疾病发作的有用性。

 

MBDA评分是通过12种生物标志物的表达来计算的，包括sTNFR1、IL-6、血管内皮生长因子、CRP和MMP-3，这些也在本研究中进行了评估34。sTNFR1是由肿瘤坏死因子-α-转化酶（TACE）的TNFR1蛋白水解脱落产生的，TACE是锌金属蛋白酶ADAM（一种去整合素和金属蛋白酶）家族的成员35。如图2所示，sTNFR1浓度与DAS28-ESR呈正相关，且sTNFR1高于临界值的患者的DAS28-ESR值显著高于低于临界值的患者（中位数分别为2.3和1.6，p = 0.022）。

 

这些结果表明，纳入MBDA评分的sTNFR1即使在达到SDAI≤ 3.3的患者中也是RA疾病活动的有效生物标志物。

 

 

除了图3所示的结果之外，对停用TNF抑制剂的患者进行敏感性分析（n = 26）显示，83.3%（10/12）的sTNFR1患者出现RA发作，显著高于28.6%（4/14）的sTNFR1患者出现RA发作（p = 0.0079）。此外，结合sTNFR1和IL-2生物标记物有希望预测bDMARD停药后RA发作（图2）。

 

尽管在其他一些非风湿性疾病的研究中也发现IL-2的血药浓度非常低（约1 pg/mL），并且在最近一项通过综合评分预测无药物RA缓解的研究中，IL-27和布尔缓解大多低于检测下限，以及因此，只有通过高灵敏度测量才能检测到IL-2，IL-2对于调节性T细胞的发育和扩张是至关重要的，调节性T细胞可能与RA的持续缓解有关。 

 

S-PLEX Human IL-2 Kit

灵敏度(LLOD)：7.3 fg/mL (比ELISA灵敏度高1000+倍）

https://www.mesoscale.com/en/products/s-plex-human-il-2-kit-k151z2s/