通过CRISPR/Cas9系统完成基因编辑/转录激活操作后,接下来至关重要的步骤就是通过实验确认基因操作的效率,是否达到我们的实验预期。目的基因是否已经被敲除(无法表达),亦或者是否已经完成转录激活,目的蛋白表达含量显著提高?这个问题解决与否直接关系到我们后续的现象与机制研究。
检测目的基因的转录水平变化,可通过qPCR实验分析目的基因转录的mRNA表达水平,优宁维为您提供分子生物学领域金标准品牌QIAGEN系列产品,为您提供从mRNA提取,反转录,到荧光定量PCR全套解决方案,具体产品如下:
qRCR实验检测可以从转录水平分析目的基因是或否被CRISPR系统成功调控,但分析基因表达调控,最直接的方式还是直接对目的蛋白进行定量/半定量分析,检测目的蛋白是否被敲除(无表达)或转录激活(过表达)。经典的蛋白半定量实验为蛋白免疫印迹实验(western blot,WB),通过特异性抗体,可以直观检测目的蛋白在基因编辑样本与对照样本中的表达差异,反应出基因编辑是否成功。通过WB检测目的蛋白表达水平,也是最常用的实验方式。抗体专家优宁维联合CST、R&D、GE、Millipore、Jackson、Absin、LabEx等国内外知名品牌,为您带来专业、全面、安全的一体化WB检测产品与服务,助力您的科研进程。具体产品如下:
确定了目的基因被成功调控以后,接下来就可以进行机制研究了。优宁维提供多种单/多因子检测产品与服务,方便检测信号通路、细胞因子等表达差异,助力机制研究,详情请点击以下链接了解更多。
到这里,小优专题第二期之CRISPR/Cas9篇也要完结了,相信通过这个专题,大家对CRISPR/Cas9系统最主要的两大应用—基因剪切以及转录激活都有了较为深刻的认识,在涉及到相应的实验时,不要忘记优宁维的产品哦。优宁维为您提供全面、专业以及高质量的CRISPR/Cas9相关产品,助力科研。
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