ELISA常见样本类型处理

样本类型

处理方法

细胞培养上清

①收取细胞上清；

②离心10min（4℃，3000g），取上清。建议进行两次离心和取上清；

③建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

血清

①不含抗凝剂的采血管采血，室温静置2小时（避免震动，防止溶血）；

②离心20min（4℃，3000g），取上清。建议进行两次离心和取上清；

③建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

血浆

①含抗凝剂（EDTA、肝素，具体采取哪种抗凝剂，参考说明书）的采血管采血；

②离心20min（4℃，3000g），取上清。建议进行两次离心和取上清；

③建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

细胞裂解液

①收集细胞，PBS清洗后，离心10min（1000g，4℃），弃去上清；

②加入适量裂解液（107细胞对应200-300ul裂解液），放置于4℃冰箱（20min）；

③离心10min（13000rpm，4℃），取上清，建议进行两次离心和取上清；

④测定BCA总蛋白浓度；

⑤建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

组织裂解液

①适量裂解液加入组织中（10mg对应100-200ul裂解液）；

②组织破碎器处理组织至匀浆（冰上处理，放置于4℃冰箱（20min））；

③离心10min（13000rpm，4℃），取上清，建议进行两次离心和取上清；

④测定BCA总蛋白浓度；

⑤建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存