【罗工秘籍43】Flowjo分析凋亡实验圈门小妙招

很多做凋亡实验的小伙伴，数据分析时对于如何圈门总是很疑惑，细胞分群不明显？怎么确定门的位置？

今天罗工给大家分享小方法，让你凋亡分析得心应手！

1 对照圈门

通常，做凋亡实验会有未处理组和处理组样本，如果未处理组的正常、早凋、晚凋细胞分群比较明显，门的位置就很好确定，那我们可以将对照组的门直接应用到处理组，这种通过对照确定圈门位置的方式也是很常见的一种方法。

 
2 热度条辅助法
 

理想中的分群总是想像左图这样？然而理论和实践总是有差别，有时候得到的结果像右图这样。
 
那么像右图这样的流式图门的位置如何确定呢？其实Flowjo自带的一些小工具就可以帮助我们解决这种情况，可以利用热度条（Color Axis）辅助圈门：
 

首先，我们打开PI对应的Color Axis，根据热度条的颜色，确定PI的位置。之后，再把Annexin V对应的Color Axis打开，确定Annexin V的阳性位置。这样就可以用热度条的方法确定门的位置了。
 

3 参考双阳位置

当单独的Annexin V阳性分群不明显的时候，可以通过双阳的位置进行界定。确定了双阳的位置，就等于确定了单阳性以及双阴性的位置。双阳的位置一般都会比单阳的位置更稳定和明显。
 
今天的凋亡流式图圈门系哦啊方法就给大家分享到此，希望能帮助到各位小伙伴~