背景:质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子。
在各种实验当中对质粒的要求有很大区别,今天小优整理了质粒纯化的选择工具,可根据实验需求对号入座哦~
测序级纯质粒纯化产品
测序级纯度质粒 DNA 特别适合基础实验室操作包括测序,PCR,限制性酶切和 DNA 转化。
QuickLyse Miniprep Kit
菌体重悬液和裂解液混合后,采用离心柱方式,仅用 9 分钟就可方 便快速的从多达 1.5 ml 的菌液中制备 7 μg 的质粒 DNA。该产品特别适 合高拷贝质粒,最大程度了减少手动操作时间。制备得到的 DNA 可用 于测序,限制性酶切。(下图)
QIAGEN PlasmidAmp Kit
无需过夜细菌培养即可从单菌落直接扩增质粒 DNA(扩增线 性质粒可长达 9 kb),试剂盒专门适合用于 ColE1- 起源的质粒(例 如:pUC19,pBR322 等,包括以其为来源的质粒),试剂盒内特殊的混合酶保证了高保真的扩增并且反应体系可以轻松放大。QIAGEN PlasmidAmp Kit 特别适合于 cDNA 文库筛选。
分子生物学级纯质粒纯化产品
分子生物学级纯度 DNA 适合各种实验室应用,包括克隆,高品质测序,转染强壮细胞。
QIAprep® Spin Miniprep Kit
该试剂盒是最畅销的质粒小提试剂盒,它采用硅胶膜方法纯化多至 20 μg 分子生物学级别纯的质粒 DNA。处理方式灵活,可以 选择真空和离心的方法。添加了 LyseBlue 试剂可以监测裂解和中和步骤 帮助获得最大产量,并且可以在 QIAcube上进行自动化制备。
转染级纯度质粒 DNA
QIAGEN 阴离子交换树脂提供转染级纯度 DNA,相当于 2 倍氯化铯梯度离心制备纯度。获得的质粒 DNA 适合各种实验室应用如大多数细胞的转染和较大难度的酶反应,20μg-10mg产量可自由选择。
超转染级纯度质粒 DNA
超转染级纯质粒适用于一些特殊应用如敏感细胞或原代细胞转染, 显微注射,质粒介导的基因沉默,体外基因转移,基因治疗及疫苗制备等。
EndoFree Plasmid Kits
超转染级质粒制备 整合在孵育步骤的 EndoFree® Buffer 内毒素去除液将内毒素水平降 低到低于 0.1 EU/μg DNA。所有的蛋白质,RNA 成分和其他杂质成分 都被阴离子交换树脂柱去除。DNA 纯度超过两次氯化铯梯度离心处理得 到的结果。
质粒查询指南
纯度级别 | 试剂盒 | 规格 | 质粒片断大小 | 样本起始体积 | 产量 | 操作方式 | 操作所需时间 | 下游应用 | 货号 |
测序级纯低通量 | Quicklyse Miniprep Kit | Mini (100)、Mini (250) | 10 kb | 1.5-3 ml | 最大7 ng | 手动,离心方式 | 9分钟 | 自动化测序,限制性酶切,克隆,PCR | 27405 |
27406 | |||||||||
分子生物学级纯 | QIAprep Spin Miniprep Kit | Mini (50)、Mini (250)、Mini (1000) | 50 kb | 5 ml(高 拷贝)、10 ml(低 拷贝) | 最大30 ug | 手动或自动化操作 | 少于30 分钟 | 自动化测序,限制性酶切,连接和转化, 体外转录/翻译,普通细胞转染 | 27104 |
27106 | |||||||||
27106*4 | |||||||||
QIAprep Spin Miniprep Columns -100 | 27115 | ||||||||
QIAGEN Plasmid Plus Kit |
Midi (25)、Midi (100)、Maxi (25)、Maxi (100)、Mega (5)、Giga (5) | 100 kb | 25 ml (Midi)、100 ml (Maxi)、500 ml (Mega)、2500 ml (Giga) | 200-250 ng (Midi)、750-1000 pg (Maxi)、2.5 mg (Mega)、10 mg (Giga) | 手动,需要 使用真空底 座(例如QIAvac24 Plus) | 20分钟 (Midi)、20分钟 (Maxi)、40分钟 (Mega)、50分钟 (Giga) | 限制性酶切,克隆,体外转录/翻译,细胞转染(普通细胞和某些敏感细胞) | 12941 | |
12943 | |||||||||
12945 | |||||||||
12963 | |||||||||
12965 | |||||||||
12981 | |||||||||
12991 | |||||||||
大规格纯化(20 pg -10 mg) | HiSpeed® Plasmid Kits | Midi (25)、Maxi (10)、Maxi (20) | 最大50 kb | 50 ml (Midi)、250 ml (Maxi) | 200 ug (Midi)、750 ng (Maxi) | 手动(HS新树脂,更快流速更高结合力,沉淀 器) | 45分钟 (Midi) 、60分钟 (Maxi) | 转染,体外转录,克 隆,测序 | 12643 |
12662 | |||||||||
12663 | |||||||||
转染级大规格纯化 | QIAGEN Plasmid Plus96 Miniprep Kit | 4 × 96 | 40 kb | 1.25-5 ml | 15-50 ng | 手动或自动化操作,可配合使用真空底座(例 如 QIAvac 96) | 50分钟 | 敏感型细胞转染,制备短发卡载体(sh- Vectors),限制性酶 切,克隆,测序 | 16181 |
QIAGEN Plasmid Kits | Mini (25)、Mini (100)、Midi (25)、Midi (100)、Maxi (10)、Maxi (25)、Maxi (100)、Mega (5)、Mega ⑸、Giga (5) | 最大150 kb | 3-10 ml(Mini)、25-100ml (Midi)、100-250 ml (Maxi)、500ml-2.5 L (Mega)、2.5-5 L(Giga) | 最大20 pg(Mini)、100 pg (Midi)、500 pg (Maxi)、2.5 mg (Mega)、10 mg (Giga) | 手动(重力 流方式过 柱) | 80分钟(Mini)、150分钟 (Midi)、160分钟 (Maxi)、220分钟 (Mega)、320分钟 (Giga) | 转染和体外转录 | 12123 | |
12125 | |||||||||
12143 | |||||||||
12145 | |||||||||
12162 | |||||||||
12163 | |||||||||
12165 | |||||||||
12181 | |||||||||
12183 | |||||||||
12191 | |||||||||
QIAGEN Large- Construct Kit | Midi | 最大250 kb | 500 ml | 50ug BAC/PAC/P1或200 ug粘粒 | 手动,重力流方式 | 280分钟 | 亚克隆和鸟枪法基 因文库制备,大分子DNA直接测序,转染 | 12462 | |
超转染级纯 | Endofree Plasmid kit 畅销 | Maxi (10)、Mega (5)、Giga (5) | 最大50 kb | 100-250 ml (Maxi)、 500ml- 2.5 L (Mega)、2.5-5 L (Giga) | 500 pg (Maxi)、2.5 mg (Mega)、10 mg (Giga) | 手动(重力流方式过柱) | 150分钟 (Maxi) 220分钟 (Mega) 310分钟 (Giga) | 敏感细胞转染,基因 治疗和基因疫苗研 究,质粒介导的基因 沉默 | 12362 |
12381 | |||||||||
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