组织样本做ELISA实验如何减少实验误差

哈喽，大家，我是你们的小优，今天这篇文章拿出来，主要是因为有些学校客户咨询，不知道大家有没有这样的疑问？

用动物组织样本做ELISA时实验，如何确定排除检测误差？它与western blot定量哪个实验结果更可靠？

优宁维技术解析

①关于实验选择

定量检测的话肯定是选ELISA。Western blot只是一个半定量的实验方法。

②关于排除检测误差

1.  实验人员一定要选好合适的内参，比如可以测目标蛋白/总蛋白，则内参是总蛋白量，如果使用目标蛋白/总组织重量，则很不准确，因为抽提过程的效率不稳定，即每克组织能够提取出来的蛋白量不固定，而且每个组织含水/含不相干的组织量也不同。建议可以参考相关文献来选择内参。

2.  最普通的查验误差的办法，每个试样多测几个孔。一般至少两个，三个更好。确定每个孔读数一致或非常相近，则知道结果比较可信。

③组织样本的处理原则

1.  称取的组织重量不能低于50mg。
2.  匀浆的比例按照10%，即1g组织加9ml的匀浆液，匀浆液一般选取PBS(PH=7.2-7.4)
3.  组织在匀浆器匀浆过程中，匀浆液应该分2次加进去，这样匀浆更充分。
4.  充分匀浆完成后离心取上清，离心机的转数选取2000-3000转每分，转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟！