外泌体 & miRNA完整解决方案

细胞外囊泡 (extracellular visicles，EV) 是由细胞释放出的携带并保护细胞来源生物信息分子物质的特殊结构，可通过转运核酸和蛋白质等生物信息物质参与体内靶细胞的信号调节，并作为药物或疫苗的载体在抗肿瘤治疗、干细胞治疗等领域发挥关键作用，而其中EV中的RNA分子 (exoRNA) 因其独特的表达模式而受到了最为广泛的关注。

一、外泌体及miRNA纯化

① 外泌体纯化
沉淀法miRCURY®外泌体纯化试剂盒 畅销
※ 从不同起始材料中进行外泌体提取：尿液样本2-10 mL，CSF样本1 mL，细胞培养液 1-10 mL ；血浆/血清0.2-1.4mL
※ 2小时内完成外泌体提取
※ 适用于多种应用，如miRNA或RNA profiling

订购信息

产品	说明	货号
miRCURY Exosome Serum/Plasma Kit	沉淀法，从血清或血浆中提取外泌体及其他胞外囊泡	76603
miRCURY Exosome Cell/Urine/CSF Kit	沉淀法，从细胞培养上清液，尿液及CSF中提取外泌体及其他胞外囊泡	76743

亲和柱膜法外泌体分离及外泌体内RNA(含miRNA)的纯化
exoEasy Maxi Kit  货号：76064
从血浆、血清、细胞培养上清及其他生物液体中分离完整的exosome及其他细胞外囊泡

※ 适用于囊泡功能性检测及物理和生化分析
※ 可在25分钟内纯化获得exosome及其他细胞外囊泡
※ 离心柱纯化流程，可平行处理多个样品
※ 可处理大体积的样品(4 ml血浆或血清，或32ml细胞培养上清)，灵敏检测低丰度转录本

exoRNeasy Serum/Plasma Kit  畅销
采用亲和性膜离心柱，可从来自血清、血浆、尿液、细胞上清等样本中分离exosome和其他细胞外微泡中高效分离RNA。该试剂盒能够快速、便利的获得结果，十分适用于敏感的下游应用。

订购信息

产品	说明	货号
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50)	过柱法，直接从样本里面得到外泌体里面的RNA，4ml上样量	77164
exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit (50)	过柱法，直接从样本里面得到外泌体里面的RNA，lml上样量	77144
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)	过柱法，直接从样本里面得到外泌体里面的RNA, 10个4ml+10个1ml上样的柱子	77023
exoEasy Maxi Kit (20)	过柱法，非超速离心，得到纯度更好没有碎片的外泌体	76064

特殊样本外泌体及miRNA纯化试剂盒订购指南

提取方法	适用样本	上样量	货号	品名	规格	说明
膜亲和法	血浆、血清、脑脊液	1-4ml	77164-Qiagen	exoRNeasy Maxi Kit (50)	50T	提取外泌体以及外泌体中的总RNA
		需要看电镜	76214	Buffer XE (45 ml)	45ml	洗脱囊泡的buffer
	细胞培养上清	8ml	77144	exoRNeasy Midi Kit (50)	50T	提取外泌体以及外泌体中的总RNA
		最多32ml	77164-Qiagen	exoRNeasy Maxi Kit (50)	50T	提取外泌体以及外泌体中的总RNA
		样本量大于8ml	76204	Buffer XBP (250 ml)	250ml	样本量大于8ml会不够需购买
		需要看电镜	76214	Buffer XE (45 ml)	45ml	洗脱囊泡的buffer
	尿液	4ml	77144	exoRNeasy Midi Kit (50)	50T	提取外泌体以及外泌体中的总RNA
		16ml	77164-Qiagen	exoRNeasy Maxi Kit (50)	50T	提取外泌体以及外泌体中的总RNA
		/	77900	Reagent UI (1 ml)	12	用于尿液样本中short RNA的提取的去抑制剂的试剂
		/	74204	RNeasy MinElute Cleanup Kit (50)	50T	用于尿液样本中short RNA的提取的柱子

② miRNA纯化：Copurifcation of miRNA and total RNA 
产品特点：
※ 可以单独富集各种组织、细胞样品中的miRNA和其他小RNAs (＞18nt)，做芯片分析时单独分离可能会有帮助 
※ 推荐同步纯化包含miRNA的总RNA，这样有助于一次cDNA合成可以获得所有类型RNA信息，便于同时进行miRNA，mRNA或其他非编码RNA检测
※ 硅胶膜技术确保获得最好纯度miRNA，不会有Trizol方法带来的选择性miRNA丢失，适合各种下游检测

miRNeasy Serum/Plasma Kit (货号：217184)
※ 同样使用经典的硅胶膜法
※ 该试剂盒适用于使用柠檬酸盐或EDTA抗凝的血清 (不能使用肝素，会干扰下游的实验)
※ 保证清洗缓冲液的温度在20-30°C，否则会有盐类的残留
※ 配合使用Spick-in control，对纯化效率及下游检测进行监测

miRNeasy Serum/Plasma Kit
RNA片段选择	大于18nt
起始样本量	200ul
最小洗脱体积	10ul
RNA产量	60-150ng
内参	C.elegans miR-39

miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit (货号：217204) 畅销
※ 采用UCP MinElute纯化柱，更安全、更小洗脱体积
※ 纯化高品质含胞外/外泌体非编码RNA(miRNA)的总RNA，适合任何下游应用

miRNA纯化试剂盒订购指南

样本类型	试剂盒名称	试剂盒货号	样品量	洗脱体积	处理	纯化类型	应用
动物组织或细胞	miRNeasy Mini Kit	217004	50mg（脂肪100mg）组织，1 x 10 7细胞	30ul	手动（离心或真空）	miRNA、总RNA	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
	miRNeasy Micro Kit	217084	5mg（脂肪10mg）组织， 1 x 10 6细胞	10ul
	miRNeasy 96 Kit	217061	50mg（脂肪100mg）组织，1 x 10 7 细胞	Min. 2 x 45 µl
	组织miRNA提取试剂盒	abs60261	10-20mg的组织	30ul	手动	miRNA	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
	细胞miRNA提取试剂盒	abs60262	1 x 10 7 细胞	30ul	手动	miRNA	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
	miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kits	217604	最多30 mg冷冻组织（15 mg稳定组织）， 最多1 x 107的细胞	30 µl	手动（监控），自动（QIAcube连接）	miRNA, total RNA	NGS, real-time RT-PCR, microarray
	miRNeasy Tissue/Cells Advanced Micro kit	217684	最多5mg的组织，最多1 x 106的细胞	默认值为20µl，最小值为10µl	手动（监控），自动（QIAcube连接）	miRNA, total RNA
	Allprep DNA/RNA/miRNA Kit	80224	组织：不超过30 mg的新鲜或冷冻组织；细胞：不超过1 x 107细胞	/	/	DNA、RNA、miRNA	/
血液样本	血液miRNA提取试剂盒	abs60260	160μL血液样本	30 µl	手动	miRNA	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
外泌体	外泌体RNA提取试剂盒	abs60263	200μL外泌体样本	40 µl	手动	Total RNA，miRNA,	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
FFPE组织切片	miRNeasy FFPE Kit	217504	最多4片，每个截面的厚度为10µm，表面积为250mm 2	14-30 µl	手动（QIAcube上的自动处理协议可用）	miRNA, total RNA	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microArray
稳定在RNAprotect Animal Blood Tubes中的小鼠、大鼠及其它动物的血液 稳定并纯化	miRNeasy Protect Animal Blood System	76544	100 µl or 500 µl animal blood	14 µl	手动（离心）	Total RNA	Northern、杂交、RT-PCR、定量、实时RT-PCR、下一代测序、阵列分析
PAXgene Tissue Container 中的组织	PAXgene Tissue miRNA Kit	766134	4 x 15 x 15 mm	14–40 µl	手动（离心）	miRNA	Northern杂交分析、RT-PCR和定量、实时RT-PCR、微阵列分析
稳定在 PAXgene Blood RNATubes 中的人血液	PAXgene Blood miRNA Kit	763134	2.5 ml	40 µl	手动（离心）或在QIAcube上	miRNA	RT-PCR和实时RT-PCR、cDNA合成、northern、dot和slot blot分析、引物延伸、微阵列分析
血清、血浆、尿液等无细胞体液	miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit	217204	≤ 200ul	/	/	从少量血清和血浆中纯化无细胞总RNA，主要是miRNA和其他小RNA	生物标志物发现、表达式分析、下一代测序、定量、实时RT-PCR、微阵列分析
	血浆血清miRNA提取试剂盒	abs60264	≤ 200ul	30ul	手动（离心）		RT-PCR和实时RT-PCR、cDNA合成、northern、dot和slot blot分析、引物延伸、微阵列分析
	miRNeasy Serum/Plasma Kit	217184	≤ 200ul	/	/		生物标志物发现 miRNA分析 miRNA测序 miRNA分析 Northern印迹分析 微阵列分析
	exoRNeasy   Kits	77144 / 77164 / 77023	midi规格可有效处理较小的样本体积（最多1 ml血清/血浆或4 ml尿液），而maxi规格可使用大样本体积（最多4 ml血清/血浆、16 ml尿液或32 ml细胞培养上清液）	/	改进了传统的超速离心微囊分离方法，仅需20分钟即可产生纯化的细胞外囊泡	miRNA	转录组学 miRNA分析 mRNA分析 RNA测序
植物	miRNeasy Mini kit	217004	50mg（脂肪100mg）组织，1 x 107细胞	30 µl	手动（离心或真空）	miRNA, total RNA	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray

二、miRNA定量

① miRCURY LNA miRNA qPCR检测系统

Exiqon microRNA qPCR系统将通用逆转录的高灵敏度，高效率与锁核酸修饰的定量引物的高特异性相结合，在3个小时之内即可完成microRNA表达分析。miRCURY LNA miRNA qPCR系统可提供assays及panels规格，20ng total RNA无需预扩增即可在96孔及384孔板上进行上百microRNAs的精准定量。miRCURY LNA miRNA qPCR检测系统具有以下特点：
● 极高的灵敏度：低至1pg total RNA即可进行可靠的定量
● 极高的特异性：LNA引物可精确区分只有一个碱基差异的miRNA异构体
● 实验操作简单方便：在3小时内即可完成从样本到数据分析的整个流程

miRCURY LNA RT kit （货号：339340）
用于一链合成，与miRCURY LNA miRNA PCR Assays / Panels搭配使用效果最佳，包含RNA spike-in模板。

miRCURY LNA miRNA PCR Assay / Custom PCR Assay / miRCURY LNA miRNA PCR Panels
200次反应的预制或定制LNA miRNA PCR primers，用于目标miRNA表达水平检测。

miRCURY LNA SYBR Green PCR Kits（货号：339345、339346、339347）
用于qPCR检测，包含ROX染料。

miRCURY LNA miRNA PCR Starter Kit（货号：339320） 爆品
包含该套件包括UniSp6模板及引物，一个候选内源对照引物组（miR-103a-3p）和两个经过验证的引物组（人、大鼠、小鼠），并通过LNA技术进行了增强。这些试剂能够定量分析多达20个样品。

订购信息

产品	说明	货号
miRCURY LNA SYBR Green PCR Kit	2X miRCURY SYBR Green Master Mix, RNase-Free Water	339345
		339346
		339347
RNA Spike-In Kit, ForRT	包含 UniSp2、UniSp4、和 UniSp5 RNA 内参模板混合物及 cel-miR-39-3p RNA内参模板	339390
miRCURY LNA RT Kit	包含 8-64 cDNA 合成反应：5x RT Reaction Buffer, 10x RT Enzyme Mix, UniSp6, RNA 内参模板,RNase-Free Water	339340
miRCURY LNA miRNA PCR Assay	200 次反应的 LNA miRNA PCR primers	339306
miRCURY LNA miRNA Custom PCR Assay	200 次反应的定制 LNA miRNAPCR primers	339317
miRCURY LNA miRNA PCR Starter Kit	2个可选的miRCURY LNA PCR Assay，spike-in templete & assay ，内参 assay及20次逆转录，100次PCR所用的试剂	339320
miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assay (200)	200 次探针法反应的 LNA miRNA PCR primers	339350
miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Assays	200 次反应的定制探针法 LNA miRNA PCR primers	339351
miRCURY LNA Probe PCR Kit (200)	2X QuantiNova Probe Master Mix, 10X miRCURY Probe Univ. Primer, Rox Reference Dye, RNase-Free Water	339371
		339372
		339373

图1：PolyA尾添加到成熟的miRNA模板中（步骤1A）。使用带有3' degenerate anchor及5' universal tag的PolyT primer进行cDNA合成（步骤1B）。用一对microRNA特异性LNA primer对cDNA进行扩增（步骤2A），使用SYBR® Green或probe进行检测（步骤2B）。

图2：低至1pg total RNA 即可进行精准定量。人 AM6000 total RNA梯度稀释后进行定量，所有的microRNA assay均显示出线性相关R2＞0.99。

② 爱必信miRNA定量分析系列产品
miRNA加尾法和探针法逆转录试剂盒产品特点：
● 基因工程优化的Poly A聚合酶，miRNA Poly A聚合高效快速；
● 特别设计的含Oligo d(T)的引物，能够与miRNA Poly A+高效结合，RT效率高于多家同类试剂；
● 一次逆转录可获得多个miRNA的RT产物，后续可进行多个miRNA的检测，极大节省样本用量；
● 可配套 miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂或者iRNA探针法荧光定量PCR试剂使用，轻松获得优化的实验结果并可免费获得配套的下游引物。

miRNA茎环法逆转录试剂盒产品特点：
● 高效的基因工程优化的逆转录酶，可大幅提升miRNA RT反应的效率；
● 特别设计的茎环引物可高效、特异性地反转录目的miRNA，获得加长的miRNA cDNA，不仅可用于染料法qPCR, 也可用于探针法qPCR；
● 搭配 miRNA茎环染料法荧光定量PCR试剂盒，可获得优化的实验结果并可免费获得茎环引物和上下游引物的设计和序列信息。

miRNA系列产品

货号	产品名称	规格	应用
abs60265	miRNA加尾法逆转录试剂盒	20T40T	miRNA加尾逆转录试剂，可配套 miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂使用
abs60266	miRNA加尾法逆转录试剂盒（血浆）	25T50T	miRNA加尾逆转录试剂；特别适用于血浆、血清等miRNA含量较低的液体样本提取的极微量miRNA的逆转录
abs60267	miRNA探针法逆转录试剂盒	20T40T	miRNA探针法逆转录试剂；加尾的，miRNA探针法荧光定量PCR试剂配套使用
abs60268	miRNA探针法逆转录试剂盒（血浆）	20T40T	miRNA探针法逆转录试剂；加尾的，特别适用于血浆、血清等miRNA含量较低的液体样本提取的极微量miRNA的逆转录
abs60269	miRNA茎环法逆转录试剂盒	25T50T	茎环法miRNA逆转录试剂；与miRNA茎环染料法荧光定量PCR试剂盒配套使用
abs60270	miRNA茎环染料法荧光定量PCR试剂盒	200T400T	SYBR Green染料法定量试剂，搭配的逆转录是茎环法的
abs60271	miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂盒	200T300T400T	SYBR Green染料法定量试剂，搭配的逆转录是加尾法的
abs60272	miRNA探针法荧光定量PCR试剂	100T200T400T	探针法定量试剂；搭配的逆转录是加尾形式的探针法逆转录试剂盒

三、高通量miRNA定量及筛选

① miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panel：集成式筛选多个miRNA 的表达
产品特点：
• 即用型 miRNA PCR panel 专注于特定应用、样本类型或疾病  
• 快速且易于使用，无需预放大
• 高重现性和最小技术变化的简单协议
• 可靠区分密切相关的 miRNA 以及成熟和前体 miRNA

miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panel快速索引

英文名称	中文名称
Apoptosis	凋亡
B-Cell Activation	B 细胞活化
Brain Cancer	脑癌
Breast Cancer	乳腺癌
Cancer	癌症
Cancer PathwayFinder	癌症ｍｉＲＮＡ 发现者
Cancer Stem Cells	肿瘤干细胞
Cardiovascular disease Focus	心血管疾病
Cell Development & Differentiation	细胞分化和发育
CSF-Exosome	CSF-外泌体
Diabetes	糖尿病
Fibrosis	纤维化
Hypoxia Signaling	缺氧信号
Immunopathology	免疫病理学
Inflammatory Response & Autoimmunity	炎症反应和自身免疫
Liver miFinder	肝脏miRNA 发现者
miFinder	miRNA 发现者

订购信息

产品	说明	货号
miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panel	以上任一panel	339325
miRCURY LNA miRNA QC PCR Panel	质控板，适用于样本质量差，正式panel前的质检	339331
miRCURY LNA Custom PCR Panel	定制miRNA pcr panel	339330

四、microRNA功能研究工具

① miRNA Mimic
 miRNA mimic被设计用来模拟自然发生的、成熟的miRNA。将miRNA模拟物引入细胞将增加含有该特定miRNA的RNA诱导沉默复合物(RISC)的比例。通过研究这种miRNA活性增加的表型后果，有可能发现miRNA的功能。

（1）LNA修饰mimic
订购信息：

产品	说明	货号
miRCURY LNA miRNA Mimic	5nmol或20nmol，标准脱盐可选FAM标签	339173
		339174
miRCURY LNA Premium miRNA Mimic	5nmol，HPLC纯化，带有生物素标签	339178
miRCURY LNA miRNA Mimic Negative Control	5nmol或20nmol，FAM标签或者生物素标签可选	Varies YM00479902–
miRCURY LNA miRNA Mimic Negative Control 4	5nmol或20nmol，FAM标签或者生物素标签可选	Varies YM00479903–
miRCURY LNA miRNA Mimic Negative Control 5	5nmol或20nmol，FAM标签或者生物素标签可选	Varies YM00479904–

(2)miRIDIAN mimic
订购信息：

产品类型	规格	货号
miRIDIAN microRNA Mimic	2/5/10/20/50 nmol	C-HMR-XX-0005
		C-HMR-XX-0020
		C-HMR-XX-0050
		C-HMR-XX-0010
		C-HMR-XX-0002
shMIMIC Lentiviral microRNA	甘油菌质粒	GSM11927
		GSH11926
		GSR11928
shMIMIC Inducible Lentiviral microRNA	甘油菌质粒	GSH11929
		GSM11930
		GSR11931
miRIDIAN microRNA Hairpin Inhibitor	2/5/10/20/50 nmol	IH-HMR-XX-0005
		IH-HMR-XX-0010
		IH-HMR-XX-0020
		IH-HMR-XX-0050
		IH-HMR-XX-0002
模拟物Mimic	阳性对照	阴性对照	转染对照
	PPIB, GAPDH, miR-122	Negative1, 2	Transfection Control with Dy547

② miRNA Inhibitors and Power Inhibitors
miRNA Inhibitors 是一种反义寡核苷酸，具有与其靶点互补的完整序列。当被导入细胞时，它们将目标miRNA隔离在高度稳定的异源双链体中，有效防止miRNA与其正常细胞相互作用。有三种不同类型的miRNA Inhibitors可供选择。

(1)LNA修饰inhibitor
订购信息：

产品	说明	货号
miRCURY LNA miRNA Inhibitors	5 nmol，骨架PO即正常的磷酸二酯核苷酸键；可选FAM标签	339121
miRCURY LNA miRNA Power Inhibitors	1 nmol、5nmol或15nmol；骨架PS（不易降解），效率比普通版本更高，无需转染试剂，可选FAM标签	339130
		339131
		339132
Negative control A	1 nmol、5nmol或15nmol，普通或power款，可选FAM标签	Varies-YI00199006-
Negative control B	1 nmol、5nmol或15nmol，普通或power款，可选FAM标签	Varies-YI00199007-
Custom miRCURY LNA miRNA Inhibitors	定制的po骨架的抑制剂，规格5nmol或15nmol，可选FAM标签	339141
		339142
Custom miRCURY LNA miRNA Power Inhibitors	定制的骨架PS（不易降解）抑制剂，效率比普通版本更高，无需转染试剂，规格5nmol，可选FAM标签	339146
Custom miRCURY LNA miRNA Inhibitors in vivo Large Scale	定制的miRCURY LNA miRNA体内大规模抑制剂，通过HPLC和Na +盐交换纯化，可用量为5 mg – 1 kg 之间可选择	339203

对于每种抑制剂，我们提供以下两种对照：
阴性对照A：在NCBI和miRBase数据库中，与任何生物中的任何序列的同源性均不超过70％
阴性对照B：在NCBI和miRBase数据库中，与任何人类，小鼠或大鼠序列的同源性均不超过70％。不建议在植物中使用

(2)miRIDIAN inhibitor
订购信息：

产品类型	规格	货号
miRIDIAN microRNA Hairpin Inhibitor	2/5/10/20/50 nmol	IH-HMR-XX-0005
		IH-HMR-XX-0010
		IH-HMR-XX-0020
		IH-HMR-XX-0050
		IH-HMR-XX-0002
阻遏物Inhibitor	阳性对照	阴性对照	转染对照
	MiR-16	Negative1, 2	Transfection Control with Dy547

③ miRNA Target Site Blockers
利用靶位点阻断剂（Target Site Blockers）发挥miRNA的功能，miRNA通常会调节多个靶标的基因表达，并且抑制miRNA会导致所有这些靶标的抑制。因此，miRNA抑制后观察到的表型是几个靶标阻遏作用的综合结果。然而，放松对这些靶标中的一些靶标通常会显着地影响表型。识别这些靶标对于理解miRNA的功能至关重要。靶位点阻断剂使研究人员能够研究miRNA对单个靶标的作用。

使用靶标封闭剂研究 microRNA 的目标区域，从分子角度更有针对性的研究 microRNA 功能。单个目标对所获得的表型的作用可以通过目标位点阻断剂(TSB)进行研究，特异性地阻止了microRNA与其中一个RNA靶点的相互作用。

产品特征：
• 定制设计的目标位点阻断剂，用于特异性抑制 miRNA 目标
• 精巧的设计和卓越的高亲和力，无论目标序列如何
• 优秀的体外和体内功效
• 由于缺乏依赖于 RNase H 的 mRNA 降解，很好的性能和高蛋白表达
• 在非常低的浓度下有效，在目标位点上胜过 miRNA
• 具有持久反义活性的卓越生物稳定性     

订购信息：

产品	说明	货号
miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blocker	体外5nmol，具有不同的标签和纯化选项，以管形式提供	339194
miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blocker, in vivo ready	体内5nmol或15nmol，具有不同标签和纯化选项，以管形式提供	339199
		339200
miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers, in vivo Large Scale	体内靶点阻断剂大规模，通过HPLC和Na +盐交换纯化，可用量为5 mg – 1 kg	339201

五、LNA检测探针--NB及原位杂交
① LNA检测探针 — Northern Blotting及原位杂交
针对mRNA、lncRNA或miRNA的定位检测，Exiqon可提供LNA检测探针，序列特异性强，灵敏度高、探针标记方式灵活多样，尤其适合用于Northern Blotting和原位杂交实验，可满足研究者的不同实验需求。

LNA锁核酸探针核心优势
● 很好的灵敏性和特异性
● 可检测所有已知的mRNA、lncRNA、microRNA，并可支持定制
● Tm均一化探针可实现ISH multiplexing及自动化
● 可提供无标记，预置标记及订制标记形式的探针
● 与放射性及非放射性方法兼容
● 适用于多种样本类型

LNA探针已经成功的使用在多种样本类型中（见图1），包括整体样本（whole-mount），单细胞，冷冻切片及FFPE组织样本等。对于FFPE样本，我们推荐使用miRCURYLNA microRNA ISH Optimization Kits进行优化来调整自己探针的最佳使用量和试剂配比，从而确保自身探针实验的成功。

图1：LNA探针已经成功的使用在多种样本类型中

订购信息

产品	说明	货号
miRCURY LNA miRNA Custom Detection Probes	1 nmol 或 10 nmol 不同标记的定制miRCURY LNA miRNA检测探针	339115
		339116
miRCURY LNA miRNA Detection Probes	1 nmol 或 10 nmol 不同标记的miRCURY LNA miRNA检测探针	339111
		339112
Custom LNA mRNA Detection Probes	250 nmol 或 1 umol 合成剂量不同标记的LNA mRNA探针	339500
		339501
Control for Custom LNA mRNA Detection Probes	5 nmol Custom LNA mRNA对照探针	339508
miRCURY LNA miRNA ISH Buffer Set (FFPE)	2x Formamide-free miRNA ISH buffer, Proteinase K	339450
miRCURY LNA miRNA ISH Optimization Kit (FFPE)	进行miRNA ISH 实验建立及条件优化	339451
		339459

六、miRNA 相关转染
① 基于脂质分子的转染试剂--HiPerFect Transfection Reagent （货号：301705）
● 低至 10 pM siRNA的高效转染
● 实现低浓度siRNA的使用，最大限度减少脱靶效应
● 多种贴壁和悬浮细胞，以及原代细胞系已经利用 HiPerFect Transfection Reagent成功转染（精选细胞系详见表1）。
● siRNA 的转染可能引起脱靶效应，产生非特异性的RNAi实验结果。使用低浓度的siRNA，可大大降低脱靶效应。有了HiPerFect Transfection Reagent，低至10 pM siRNA也能观察到高效的转染和沉默，让等量的siRNA可用于更多实验（图1）。

表1 成功转染的细胞系

细胞系	细胞类型	所使用的siRNA浓度（实使Knockdown%)
K562	人慢性髓性白血病细胞	5nM(85%)
Jurkat	人T细胞	75nM(83%)
D1.1	人T细胞	50nM(84%)
RAW 264.7	小鼠巨噬细胞	25nM(77%)
J774.A1	小鼠巨噬细胞	50nM(97%)
PMA-differentiated THP-1	人急性单核细胞白血病细胞	5nM(82%)
MEL	鼠红白血病细胞	5‒20nM(50‒70%)

图1. 皮摩尔siRNA的高效转染。利用HiPerFect Transfection Reagent (3μl),在24孔板中用各种量的CDC2 siRNA和非沉默对照siRNA（对照）转染HeLaS3细胞。48小时后，通过实时定RT-PCR分析CDC2的表达。

② PEI阳离子聚合物转染试剂-- INTERFERin® （货号：101000036、101000028）更少的siRNA，更高的沉默效率，降低脱靶效应！
● 高效基因沉默效率：在多种细胞中达到超过90%的基因沉默
● 极低的脱靶效应：使用低至1nM siRNA
● 温和的转染模式：保持卓越的细胞活率
● 操作简单：兼容血清和抗生素

图注：根据标准操作手册在稳定表达荧光素酶的3LL细胞中进行转染

图注：根据标准操作手册在CaSKi细胞中进行转染

③ 活体转染方案---in vivo-jetPEI®（货号：101000040、101000030）
注射型转染试剂，用于基因治疗和疫苗！

in vivo-jetPEI®的优势：
● 使用便捷：两步操作
● 给药方便：可用于各种注射途径，以达目标
● 量身定制：专家优化的操作方案

in vivo-jetPEI®的介绍：
● 适用于任何动物模型的DNAsi/sh/miRNA活体转染
● 享有盛名：先进的活体转染技术，引用文献超过700篇
● 成功的产物：从基础研究到人临床研究（提供GMP级产品）

图注：使用in vivo-jetPEI®在动物模型上的各种给药途径

七、miRNA文库构建

① QIAseq miRNA Library Kit（货号：331502、331505）
基于分子条形码技术的高精度特异性小RNA快速测序文库构建文案
● 采用分子条形码（UMI）技术用于扩增偏倚的去除
● 最低仅需1ng总RNA，可仅依靠试剂盒内含的磁珠进行纯化而无需切胶回收
● 可用于miRNA，piRNA等Small RNA的表达分析以及全新Small RNA的发现
● 基于qPCR的独特miRNA QC系统及外源参照，可用于样本质量以及测序后NGS线性度和可重复性的评估

图注：“gel-free”小RNA快速文库构建流程

订购信息

产品	规格	货号
QIAseq miRNA Library Kit (12)	12rxn，without adapters	331502
QIAseq miRNA Library Kit (96)	96rxn，without adapters	331505
QIAseq miRNA 12 Index IL (12)	12 indexes for 12 samples	331592
QIAseq miRNA 48 Index IL (96)	Two 48 indexes for 96 samples	331595
QIAseq miRNA 96 Index IL (96)	HT format (dried primes) with 96 indexes for 96 samples	331565
QIAseq miRNA 12 Index TF (12)	12 indexes for 12 samples	331582
QIAseq miRNA 48 Index TF (96)	Two 48 indexes for 96 samples	331585
QIAseq miRNA Library QC Spike-ins	96 reactions	331535
QIAseq miRNA Library QC PCR Panel Kit	48 reactions	331541
QIAseq miRNA Library QC qPCR Assay Kit	48 reactions	331551