慢病毒纯化神器——Nereus LentiHERO颠覆性技术

慢病毒载体由于能够在分裂以及非分裂细胞中稳定的整合基因组，因此成为基因以及细胞治疗中的一种有效工具。在过去的十几年中慢病毒的生产以及纯化技术已经获得了显著的进步，然而随着市场规模的扩大，对慢病毒纯化的通量以及纯度的要求日益增长。对于各大企业来说，构建具有成本效益的生产以及纯化平台具有十分重要的意义。

但是目前慢病毒载体的纯化方法和经验多是由抗体药的纯化方法和经验发展过来的，然而LVV的衣壳直径较大，在80-100 nm左右，比一般的病毒大得多，它的大小也在纯化方面带来了挑战，所以标准的基于树脂的分离方法因LVV太大而不能达到足够的效果，因此需要纯化它们，需要使用不同类型的吸附剂。此外，此外，与AAVs等病毒相比，LVV往往更不稳定。LVV包膜在功能方面扮演着重要的角色，包括转导和嗜性。但这一功能受到各种处理条件的负面影响，如温度、pH、生物处理过程中液体的离子强度的变化。介于此，Astrea Bioseparations 的科学家，基于自身的纯化和产品开发经验，开发了专门针对病毒纯化的Nereus 系列产品，目前最先推出的是针对慢病毒纯化的LentiHERO.

下面就跟大家隆重介绍一下我们的这款慢病毒纯化的产品--LentiHERO
Nereus LentiHERO™主要基于AstreAdept™基架和离子交换原理。

1.什么是AstreAdept™？
AstreAdept™是一种新型纳米纤维材料，不同于传统凝胶介质，它能通过快速的对流模式迅速捕获大量的目的蛋白，使得工艺运行流速不再受限于凝胶孔径大小。Astrea将这项技术整合到离心柱中，以将这些优势带到实验室规模的病毒载体纯化中。

2.Nereus LentiHERO™，5步离心快速慢病毒纯化

无需昂贵设备，简单几步即可实现慢病毒的纯化，配合真空设备，可实现多个样品的同步处理。让纯化像DNA提取一样简单。

3.高动态结合载量
15%穿透时，每根离心柱的动态结合载量为1.9E+10

Nereus LentiHERO™小柱以20 mv/min的速度上样，流穿收集在10mL液体中，使用p24 ELISA分析，基于上样的总VP，计算VP穿透百分比

4.高回收率，无血清培养体系大于60%

有无血清培养体系慢病毒回收率：纯化后样品中慢病毒/病毒原液%。血清(-) n=3，血清(+)n=2

5.高效去除宿主蛋白残留
减少95%的宿主细胞蛋白污染物
通过SDS-PAGE，洗脱液中检测不到宿主细胞蛋白
宿主细胞蛋白大大减少，无论进样中是否存在血清

6.功能、形态不受影响
重要蛋白，如Gag、编码衣壳、基质和核衣壳的大小不受影响
用Nereus LentiHERO™纯化的洗脱慢病毒的颗粒大小和形态不受影响
纯化慢病毒颗粒的感染性不受影响

Western blot分析使用兔多克隆抗p24 IgG检测LV特异性p24 Gag蛋白。LV洗脱物的两个重复分析如泳道 1和 2所示。gag蛋白，如p24，在24 kDa左右被发现，另一个主要的gag蛋白p55在55 kDa左右。这种结果与截留分子量 (100kDa) 过滤法浓缩的LV相同 (数据未显示)。

和同类产品比较在纯度，得率和纯化速率上面均有较大的优势


Nereus LentiHERO™ 性能总结
① 基于新型纳米复合纤维膜技术 - AstreAdept™ —— 赋能
② 易于使用的设计，实现功能性慢病毒颗粒的快速纯化和高回收率
③ 宿主细胞蛋白质残留去除95%以上
④ 同时处理多个样品，降低病毒载体开发样品制备的瓶颈
⑤ 实现10以上倍体积浓缩

通过助力研究人员加速细胞和基因疗法的开发，该技术提供了一种更具成本和时间效益的方式，以加快向有需要的患者提供创新疗法。

实验室研发离心柱产品Nereus LentiHERO™已于9月29号美国BPI会议期间上市。研发设备配套AstreaAdept™技术解决基因和细胞治疗领域工艺开发，小试以及生产规模的技术瓶颈。生产规模产品预计在2023年推出。

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