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【罗工流式秘籍50】多色流式串色严重怎么破?

时间:2023-02-07 09:16:42
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在做多色流式实验中,很多老师都会遇到的一个问题就是,染料之间串色太严重,补偿太难调了!
可谓是“众口难调调众口,补偿难调调补偿!”

 

那么,除了在一开始配色的时候通过小优进行免费的方案设计及优化升级外,我们还能做哪些来减少荧光素之间的非特异性相互干扰呢?

 

这里给大家介绍一款神奇buffer“BV stain buffer”(BSB),增强抗体稳定性,减少荧光间干扰,用了的老师都说好!


 
光说不靠谱,有图有真相。

到底为什么会出现这种补偿不足,或阴性的离散群体现象呢?

想要实现如今的多指标在同一panel中进行同时染色的需求,就一定会用到BD专利的sirigen荧光素系列标记的抗体,当多种 BV/BUV/BB染料同时使用时,我们经常会观察到一些如上图的假阳性信号。这种情况多发生在多色染色中,而在2个及以下该系列染料共同使用时并不会出现这种现象。这与染料本质为由有机多聚物构成有关。
这种异常信号与抗体结构中含聚乙二醇(PEG)有关,样本中经常会含有的抗PEG的抗体,特别是人的血液样本中,尤其是COVID-19疫苗广泛接种后,增加了血清中含有抗PEG抗体的频率。

 
Brilliant Stain Buffer 在抗体添加之前加到样品中,不仅可以减轻这些因供体中存在抗PEG抗体原因所造成的虚影,提高染色质量,还有可以稳定预混抗体保存至少 24 h等功效哦。
 
下表为常见的含PEG的荧光染料:

Brilliant Stain Buffer产品详情:

Catalog number Buffer name Size
563794 BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer 100 Tests
566349 BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer 1,000 Tests
566385 BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer Plus 1,000 Tests
659611 BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer 2.5 mL