【罗工流式秘籍70】流式抗体到底应该加多少？

Q:罗工，我最近准备开始做流式实验了，可一直有个问题很困扰，就是流式抗体究竟应该加多少才是合适的呢？

Q:我看说明书有的写加5 μl，有的加写20 μl。

Q:可是我问的师兄师姐们，都说加1μl，就是1:100或1:200倍稀释。

Q:我好迷茫啊，抗体加多了感觉经费在燃烧，加少了又担心细胞染不上。

罗工：你刚刚前面提到的几种抗体加样方式，就我个人都是不太推荐的。

罗工：咱不同的待测指标，不同的品牌，不同的荧光素标记，不同的批次，甚至不同的染色环境等都会导致抗体的效价不同。

Q:感觉越来越复杂了呢，那到底我该咋办呢？

罗工：建议在经费允许的情况下，可以直接按照官方推荐用量实验。

罗工：但想得到最优实验方案和结果，或者单纯的从节省经费的角度考量，还是建议去对咱们购买的每一个抗体进行比较科学的抗体滴定实验进行检测。

Q:这又出来一个新实验，没做过滴定啊！

罗工：抗体滴定很简单的，就像Elisa稀释标准品一样，进行倍比稀释上机检测哪个效果最好就行了！

小A师姐：我们这还有视频教程可以了解下，

https://www.bilibili.com/video/BV13t4y1B7Ch?spm_id_from=333.999.0.0

Q:好嘞，我这就去看看。

另外提醒下哈，咱官方推荐抗体用量时，往往都会着重强调或默认，染色体系为1×10^6细胞/100μl，但细胞数量确实会影响染色质量，要根据固定的染色体系，去摸索抗体浓度哦~

Q:嗯嗯，谢谢罗工，我小笔记都记好了！

参考视频：