【罗工流式秘籍77】血清和血浆样本的区别、制备和保存
时间:2023-02-07 16:45:54 浏览次数:2610
在日常实验中,血液是大家经常会收集的实验样本,除了检测其中的血细胞或免疫细胞。也会检测一些可溶性细胞因子或者免疫球蛋白等等重要成分,需要收集血液中的血清或血浆。
两者究竟有啥区别呢?
血清/血浆制备方法
血清:
1. 收集全血于不含抗凝剂or含促凝剂的血液收集管中;
2. 室温让样本自然凝血30-60 min,期间不能摇晃或震动;
3. 4℃,2500~3000 rpm离心10 min(小鼠样本转速建议减小,2000rpm左右);
4. 上清即为血清,将上清转移至新的EP管中;
制备完成后,如不需要立即进行实验,应于4℃或冰上进行分装后保存于-20或-80℃冰箱,避免反复冻融。
血浆:
血浆的制备步骤是类似的,只不过收集管为抗凝管,血液不会发生凝集,颠倒混匀后,直接从第三步往后做就可以啦~
注意:血样采集后1h之内进行处理
血清/血浆的保存
长期保存-80℃,1-2个月内保存-20℃,1周内保存 4℃
*实际上随着时间推移细胞因子都会逐渐降解,少数因子会出现升高现象
推荐-80℃ 3-6个月,-20℃ 15~30天,4℃ 24~48 h
*血清结冰时体积会增加约10%,冻存前,注意预留一定体积空间
血清/血浆的解冻方法
-80℃→-20℃→4℃→常温,逐步解冻。
速溶法不推荐,容易造成蛋白凝集,出现沉淀。
*解冻后高速离心,剧烈震荡,涡旋,等操作均会一定程度降解细胞因子!
有时候制备血清/血浆是为了检测一些细胞因子、趋化因子等等,而从前实验室中最常见的传统检测方法就是ELISA了,很多同学面对着96孔板可能会头大,且每检测一种因子就要用掉好多血清样本。
别慌,CBA技术拯救你,只要你拥有一台最低配置4色流式仪,就可以在低至25-50 μl血清或血浆样本中检测多种因子。
什么?CBA不是中国男篮吗(划掉),此CBA非彼CBA噢~
CBA(Cytometric Beads Array)是一种利用流式方法学,对液相样本中的多重蛋白进行定量检测的技术。
简单来说,就是利用不同APC荧光强度的微球结合标记区分各种不同的待测因子,再利用双抗夹心法,靠PE检测抗体,对各个因子进行表达量强度的检测。
哇!这听起来就是一个高通量的ELISA~
选择困难患者?不知该检测什么细胞因子或趋化因子?我们有多种经典且经过验证的CBA kit,多种经典因子套餐,总有一款是你的菜。
货号 | 品名 | 包含指标 | 规格 | 检测浓度范围 | |
小鼠 | 551287 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Thl/Th2 Cytokine Kit | IL-2,IL-4,IL-5,IFN-yJNF | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL |
560485 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Thl/Th2/Thl7 Cytokine Kr | IL-2,IL-4, IL-6,IFN-v,TNF,IL-17A,IL-10 | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL | |
552364 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Inflammation Kit | IL-6,IL-10,MCP-1, IFN-v.TNF, IL-12p70 | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL | |
550026 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Immunoglobulin Isotyping | lgEJgM,lgA,lgG3JgG2b,lgG2a,lgGl | 100 Tests | 10 ng/ml-0.5 mg/ml (主要 用于定性) | |
人 | 550749 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2 Cytokine Kit | IL-2JL-4,IL-5, IL-10, TNF, IFN-y | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL |
551809 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2 Cytokine Kit II | IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF,IFN-y | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL | |
560484 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2/Thl7 Kit | IL-2, IL-4,IL-6, IL-10, TNF, IFN-y, IL-17A | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL | |
551811 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Inflammatory Cytokine Kit | IL-8, IL-lp, IL-6, IL-10, TNF, IL-12p70 | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL | |
552990 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Chemokine Kit | CXCL8/IL-8, RANTES CCL5/RANTES,CXCL9/MIG,CCL2/MCP-1, CXCL10/IP-10 | 80 Tests | 10-2,500 pg/mL | |
561418 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Anaphylatoxin Kit | C3a, C4a, C5a | 80 Tests | C3d&C4d : 10-2,500 pg/mL C5a: 4-1000pg/mL | |
灵长类 | 557800 | BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Non-human Primate Thl/Th2 Cyt | IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,TNFJFN-gamma | 80 Tests | 20-5,000 pg/mL |
除此以外,我们还有CBA Flex set可以让大家根据自己的需求定制专属套装,同时检测的因子指标高达30种噢!
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