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【罗工流式秘籍77】血清和血浆样本的区别、制备和保存

时间:2023-02-07 16:45:54 浏览次数:2331

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在日常实验中,血液是大家经常会收集的实验样本,除了检测其中的血细胞或免疫细胞。也会检测一些可溶性细胞因子或者免疫球蛋白等等重要成分,需要收集血液中的血清或血浆

 

两者究竟有啥区别呢?


   

 

血清/血浆制备方法

 

血清:

1. 收集全血于不含抗凝剂or含促凝剂的血液收集管中;

2. 室温让样本自然凝血30-60 min,期间不能摇晃或震动;

3. 4℃,2500~3000 rpm离心10 min(小鼠样本转速建议减小,2000rpm左右);

4. 上清即为血清,将上清转移至新的EP管中;

制备完成后,如不需要立即进行实验,应于4℃或冰上进行分装后保存于-20或-80℃冰箱,避免反复冻融。

 

血浆:

血浆的制备步骤是类似的,只不过收集管为抗凝管,血液不会发生凝集,颠倒混匀后,直接从第三步往后做就可以啦~

注意:血样采集后1h之内进行处理

 

血清/血浆的保存

长期保存-80℃,1-2个月内保存-20℃,1周内保存 4℃

 

*实际上随着时间推移细胞因子都会逐渐降解,少数因子会出现升高现象

推荐-80℃ 3-6个月,-20℃ 15~30天,4℃ 24~48 h

*血清结冰时体积会增加约10%,冻存前,注意预留一定体积空间

 

血清/血浆的解冻方法

-80℃→-20℃→4℃→常温,逐步解冻。

速溶法不推荐,容易造成蛋白凝集,出现沉淀。

*解冻后高速离心,剧烈震荡,涡旋,等操作均会一定程度降解细胞因子!

 

 

 

有时候制备血清/血浆是为了检测一些细胞因子、趋化因子等等,而从前实验室中最常见的传统检测方法就是ELISA了,很多同学面对着96孔板可能会头大,且每检测一种因子就要用掉好多血清样本。


别慌,CBA技术拯救你,只要你拥有一台最低配置4色流式仪,就可以在低至25-50 μl血清或血浆样本中检测多种因子。

 


什么?CBA不是中国男篮吗(划掉),此CBA非彼CBA噢~

CBA(Cytometric Beads Array)是一种利用流式方法学,对液相样本中的多重蛋白进行定量检测的技术。

简单来说,就是利用不同APC荧光强度的微球结合标记区分各种不同的待测因子,再利用双抗夹心法,靠PE检测抗体,对各个因子进行表达量强度的检测。

哇!这听起来就是一个高通量的ELISA~


选择困难患者?不知该检测什么细胞因子或趋化因子?我们有多种经典且经过验证的CBA kit,多种经典因子套餐,总有一款是你的菜。

 

货号 品名 包含指标 规格 检测浓度范围
小鼠 551287 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Thl/Th2 Cytokine Kit IL-2,IL-4,IL-5,IFN-yJNF 80 Tests 20-5,000 pg/mL
560485 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Thl/Th2/Thl7 Cytokine Kr IL-2,IL-4, IL-6,IFN-v,TNF,IL-17A,IL-10 80 Tests 20-5,000 pg/mL
552364 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Inflammation Kit IL-6,IL-10,MCP-1, IFN-v.TNF, IL-12p70 80 Tests 20-5,000 pg/mL
550026 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Immunoglobulin Isotyping lgEJgM,lgA,lgG3JgG2b,lgG2a,lgGl 100 Tests 10 ng/ml-0.5 mg/ml (主要 用于定性)
550749 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2 Cytokine Kit IL-2JL-4,IL-5, IL-10, TNF, IFN-y 80 Tests 20-5,000 pg/mL
551809 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2 Cytokine Kit II IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF,IFN-y 80 Tests 20-5,000 pg/mL
560484 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Thl/Th2/Thl7 Kit IL-2, IL-4,IL-6, IL-10, TNF, IFN-y, IL-17A 80 Tests 20-5,000 pg/mL
551811 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Inflammatory Cytokine Kit IL-8, IL-lp, IL-6, IL-10, TNF, IL-12p70 80 Tests 20-5,000 pg/mL
552990 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Chemokine Kit CXCL8/IL-8, RANTES CCL5/RANTES,CXCL9/MIG,CCL2/MCP-1, CXCL10/IP-10 80 Tests 10-2,500 pg/mL
561418 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Anaphylatoxin Kit C3a, C4a, C5a 80 Tests C3d&C4d : 10-2,500 pg/mL C5a: 4-1000pg/mL
灵长类 557800 BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Non-human Primate Thl/Th2 Cyt IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,TNFJFN-gamma 80 Tests 20-5,000 pg/mL


除此以外,我们还有CBA Flex set可以让大家根据自己的需求定制专属套装,同时检测的因子指标高达30种噢!

上海优宁维生物科技股份有限公司

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