爱必信肝细胞癌类器官模型助力乙型肝炎病毒介导的m6A去甲基化增加肝细胞癌的干性和免疫逃避研究

介绍
近期，浙江大学医学院传染病诊治国家重点实验室刁宏燕老师课题组于2024年3月24 日发表在Molecular Cancer Research（IF：5.2）上题为“Hepatitis B Virus-mediated m6A demethylation increases hepatocellular carcinoma stemness and immune escape”的文章，借助肝细胞癌模型（HCC）及多种技术揭示了HBV通过在ALKBH5-YTHDF2依赖的条件下提高SNAI2的m6A修饰，促进HCC干细胞样表型的维持，并增加免疫检查点受体CD155的表达。

摘要
乙型肝炎病毒（HBV）持续感染在肝细胞癌（HCC）肿瘤发生中起着重要作用。许多研究揭示了多种癌症中N6-甲基腺苷（m6A）的关键作用，而HBV持续感染相关HCC中m6A的调节机制尚未阐明。在这里，课题组通过增强ALKBH5 mRNA的稳定性，证明HBV在HBV阳性HCC中下调m6A修饰水平。更具体地说，课题组还发现ALKBH5 mRNA在HBV阳性HCC的干细胞维持和自我更新中是必需的，但在HBV阴性HCC中是不必要的。机制上，ALKBH5去除了SNAI2基因30个未翻译区（UTR）的m6A修饰，防止YTHDF2在那里被识别，从而稳定SNAI2转录本，从而促进HBV阳性HCC中的癌干细胞特性。此外，SNAI2的表达逆转了降低ALKBH5后抑制干细胞特性的作用。此外，ALKBH5/SNAI2轴通过激活免疫检查点受体CD155来加速肿瘤免疫逃避。课题组的研究揭示了ALKBH5作为HBV相关HCC的关键调节因子，能够诱导SNAI2的m6A去甲基化，并鉴定了ALKBH5/SNAI2/YTHDF2轴在HBV感染过程中促进干细胞样表型和免疫逃逸的功能。

材料和方法
细胞培养和组织标本获取（HCC cells、Mouse Hepa1-6 cell line、NK-92MI cells）、PDX造模（HepG2.215 cells 和Hep3B cells）、Western blot分析、肿瘤球培养、多重免疫组化和定量分析、肝细胞癌类器官构建（HCC）、MeRIP-seq数据分析、NK-92MI细胞杀伤实验、IHC和评分、统计分析。

结果
1、 hbv阳性HCC细胞中m6A水平降低可增强干性维持

 

 

2、HBV增强ALKBH5 mRNA稳定性，促进干细胞样特性

 

3、在hbv阳性HCC中，ALKBH5是维持肝癌细胞自我更新所必需的因素

 

 

4、SNAI2是hbv阳性HCC中ALKBH5功能上重要的靶基因

 

5、30 UTR中alkbh5介导的m6A去甲基化通过ythdf2依赖途径稳定SNAI2 mRNA水平

 

 

6、SLUG参与alkbh5调控的hbv相关HCC的干细胞样特性
 

 

7、LKBH5/SNAI2轴通过调节CD155促进肿瘤免疫逃避

 

 

结论
总的来说，课题组的结果显示ALKBH5与SNAI2的转录物3，UTR互作进一步去甲基化m6A修饰，增强了SNAI2的稳定性以维持其高表达和促进HBV相关HCC的干性维持和免疫逃逸。精确靶向ALKBH5的表达对hbv相关HCC的治疗是至关重要的方法。
文献地址：https://doi.org/10.1158/1541-7786.MCR-23-0720

类器官培养产品推荐

货号	品名	规格
abs9495	基质胶（低因子、无酚红）	1.5mL×4/ 1.5mL×8
abs9786	Organotial人肝胆管癌类器官培养试剂盒	1kit
abs9544	Organotial人正常肝类器官培养试剂盒	1kit
abs9778	Organotial人膀胱癌类器官培养试剂盒	1kit
abs9773	Organotial人食管癌类器官培养试剂盒	1kit
abs9590	Organotial人宫颈癌类器官培养试剂盒	1kit
abs9739	Organotial人脑胶质瘤类器官培养试剂盒	1kit
abs9589	Organotial人鼻咽癌类器官培养试剂盒	1kit
abs9743	Organotial人前列腺癌类器官培养试剂盒	1kit
abs9858	Organotial人喉癌类器官培养试剂盒	1kit
abs50059	2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit	10mL/100mL
abs50056	活细胞/死细胞双染试剂盒	500T