Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78，T淋巴细胞系培养合集来袭！

为了解决大家不知道如何选择合适的细胞培养体系、不了解细胞生长特性等细胞培养难题，小优特地开启《细胞探险队》专栏，向大家介绍上百种常见细胞的形态、特点、培养体系、
传代周期、注意事项、常见问题等，帮助大家快速熟悉自己的“细胞宝宝”！各位童鞋，如果有想要了解的细胞系，也欢迎留言~

Jurkat

1.    名称：Jurkat（人T淋巴细胞白血病细胞）
2.    别称：Jurkat E6-1、Jurkat, Clone E6-1、Jurkat Clone E6-1、Jurkat(clone E6-1)、JURKAT E-6.1、JURKAT E-61、Jurkat-CloneE61、Jurkat-E6、Jurkat E6
3.    简介：Jurkat，Clone E6-1细胞来源于一名14岁男孩的急性T细胞白血病患者的外周血，最常见的Clone E6-1是Jurkat细胞的一个克隆株，是肯德尔·史密斯博士将Jurkat细胞在41°C孵育48h，于巨噬细胞上进行有限稀释克隆得到的。该细胞株用佛波酯或针对T3抗原的凝集素或单克隆抗体刺激后可产生大量的IL-2。
4.    种属：人
5.    组织来源：外周血
6.    生长特性：悬浮生长
7.    应用：免疫系统疾病研究；T细胞信号传导研究；病毒学研究；药物筛选和免疫治疗和肿瘤学研究等。
8.    细胞形态：淋巴细胞样
 

图片来源于ATCC

9.    培养条件：
（1）完全培养基配方：RPMI-1640（SH30809.01）＋10%FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO₂：5%CO₂
10.    换液频率：每2-3天更换培养基
11.    传代周期：不超过3*10⁶/ml，建议将活细胞密度控制在1*10⁵-1*10⁶/ml；当细胞密度到达80%时，及时进行传代，以防细胞过度生长状态变差
12.    传代比例：1:2-1:5
13.    冻存液配方：95%完全培养基+5%DMSO（abs9187）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14.    注意事项：
（1）细胞碎片较多且较易分化，可能是因为细胞受到机械刺激或培养基变质等原因，导致细胞死亡或损伤，形成碎片，可以通过离心去除碎片或调整培养条件等去调整细胞状态；在某些情况下，Jurkat细胞也可能会发生分化，导致细胞形态和功能发生变化，可以通过控制培养条件（如：适当细胞密度）和培养基组分（如：选择优质澳洲胎牛血清）等方法来调整细胞状态，也可以使用细胞因子或化学物质等对细胞分化状态进行人工干预；
（2）冻存复苏活率低，Jurkat细胞作为悬浮细胞，容易受到冻存的影响。提高冻存密度（一般建议冻存时细胞密度为2-3*10⁶/mL），并在复苏时逐步恢复培养条件，可提高复苏活率；
（3）细胞聚团过多：Jurkat细胞在培养过程容易形成细胞团，少量细胞聚团属于正常现象，但过多聚团可能影响细胞生长和实验结果，可以通过使用优质血清、控制细胞密度等方法来减少聚团。

CTLL-2

1.    名称：CTLL-2（小鼠T淋巴细胞）
2.    别称：CTLL2；CTLL（2）
3.    简介：CTLL-2是来源于C57BL/6小鼠的细胞毒性T细胞克隆。此细胞生长依赖于白细胞介素-2（IL-2），可用于检测IL-2。
4.    种属：小鼠
5.    生长特性：悬浮细胞
6.    应用：三维细胞培养；免疫学。
7.    细胞形态：淋巴母细胞

图片来源于ATCC

8.    培养条件：
（1）完全培养基配方：RPMI-1640（SH30809.01）＋10%FBS（SV30208.02）+100U/ml IL-2（402-ML-100）^[1]
（2）温度：37°C
（3）CO₂：5%CO₂
9.    换液频率：每周两次
10.    传代周期：在细胞密度达到2*10⁵/mL之前进行传代，否则IL-2将很快被耗尽，细胞将迅速失去活力
11.    传代比例：建议细胞接种密度为1-2*10⁴/mL
12.    冻存液配方：82.5%完全培养基+10%FBS+7.5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
13.    注意事项：
细胞复苏后开始培养后的第1-4天，细胞活力可能会很差，不过一般在开始培养后的第3-5天，细胞悬液中开始出现可存活的细胞团。通常情况下复苏后的第7-10天再进行传代培养。另外，可能需要2-3周才能观察到细胞的旺盛生长，所以在细胞进入生长期之前，要保持细胞静养。

MT-4

1.    名称：MT-4（人T细胞白血病细胞）
2.    别称：MT4
3.    简介：MT-4细胞是从一名50岁日本男性成人T细胞白血病（ATL）患者的外周血中分离出来的T细胞。
4.    种属：人
5.    组织来源：外周血
6.    生长特性：悬浮细胞
7.    应用：T细胞白血病研究；免疫系统紊乱研究；免疫学；免疫肿瘤学；毒理学；细胞和基因治疗（CGT）开发。
8.    细胞形态：淋巴细胞样
 

图片来源于JCRB

9.    培养条件：
（1）完全培养基配方：RPMI-1640（SH30027.01）+10%FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO₂：5%CO₂
10.    换液频率：2-3次/周
11.    传代周期：细胞密度达到3*10⁵-5*10⁵/mL即可传代
12.    传代比例：建议细胞接种密度为1.3*10⁵/mL
13.    冻存液配方：55%RPMI-1640+40%FBS+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14.    注意事项：
（1）部分MT-4细胞会附着瓶底，轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化；
（2）建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

HuT-78

1.    名称：HuT-78（人T淋巴细胞白血病细胞）
2.    别称：HUT 78；HuT-78；HUT-78；HuT78；Hut78；HUT78；NCI-H78
3.    简介：HuT-78细胞系是一种来源于人类T淋巴细胞的白血病细胞系，最初从一名患有成人T细胞白血病（Adult T-cell Leukemia，ATL）的患者外周血中分离而来。
4.    种属：人
5.    组织来源：外周血
6.    生长特性：悬浮细胞
7.    应用：T细胞免疫反应；白血病；病毒感染及相关疾病机制。
8.    细胞形态：淋巴母细胞样

图片来源于ATCC

9.    培养条件：
（1）完全培养基配方：IMDM（SH30228.01）+20%FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010））
（2）温度：37°C
（3）CO₂：5%CO₂
10.    换液频率：2-3次/周
11.    传代周期：每2-3天传代一次，维持细胞浓度在5*10⁴-8*10⁵/mL之间
12.    传代比例：1:2-1:4
13.    冻存液配方：95%完全培养基+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14.    注意事项：
（1）HuT-78会少量聚团生长，为正常现象；
（2）HuT-78可通过半量换液或者离心换液（1000rpm，3min）两种方式更换培养基。

参考资料

1.    Fukushima, K. and K. Yamashita, Interleukin-2 Carbohydrate Recognition Modulates CTLL-2 Cell Proliferation. Journal of Biological Chemistry, 2001. 276(10): p. 7351-7356.
2.     ATCC官网
3.     JCRB官网