WB花式翻车大赏

在科研的道路上，Western Blot实验就如同一场充满挑战的“冒险之旅”。 经常做 WB的同学常有一种感觉，这哪里是搞科研，明明是搞“玄学”。你以为自己是被上天眷顾的“实验大师”，结果却可能沦为“翻车现场”的主角。今天，就让我们一起盘点那些让人哭笑不得的WB翻车瞬间，顺便教你如何避坑，顺利晋升为“WB大师”！

 

古典派

 

@吉祥如伊

可能原因：ECL发光液灵敏度过高，或者抗体浓度和上样量过高，封闭不好

 

@降低期待就快乐：哈哈哈哈哈哈哈

让人眼前一黑又一黑
但也害怕它比我脸还干净
比如

 

@小阔爱

可能原因：无条带的可能原因较多，从样本制备到转膜封闭抗体孵育及显色都有可能，还需进一步分析。可尝试增加上样量、抗体浓度，使用超敏ECL，以及使用阳性对照。

@Tototo说：膜碎了，拼回去拼歪了

 
@五米米米米米：天 完全体会华妃那个 那是一个已经成型的男胎

 

@黄金矿工

条带弥散可能原因：蛋白上样量过多；蛋白发生降解；细胞碎片过多；电泳停止过久；核酸污染。不过这个主要是上样量高，因为前几个泳道还好。

 

一、二、三、四，小兔几也来凑热闹吗？

@孤傲的狼

可能原因： 第一个样本浓度高拖尾了，需混匀样本

躲猫猫吗？喂~ 你猫头露外面了

@小符不熬夜

可能原因：样本间浓度差异大或盐离子浓度差异大，被挤压了，需重新调齐浓度

只能给你这个了

@坏momo

可能原因：配胶问题，拔梳子的时候导致孔底部突起，蛋白往两端沉降；样本有杂质。

水…滴…石…穿？

 

@躺倒的胖子

可能原因：高背景多条带的可能原因有很多，可能是样本降解等样本问题，也有可能是抗体非特异性结合，或者封闭不足等操作原因。建议封闭液、一抗二抗稀释液均使用5%脱脂奶粉，在有目的条带的情况下降低抗体浓度。

壮壮妈内心be like

@FancyMe

可能原因：典型的反白条带，降低抗体浓度。

诶，你以为穿件白衣服我就不认识你啦

 

@匿名用户 膜蛋白真的难跑

可能原因：膜左侧被污染，未见条带

诡异的蓝光，黑色的污渍，破碎的我

 

中国水墨画派

@抑郁的花花：没有人比我更会画山水画了

可能原因：大概率胶右侧有裂痕，有的裂痕可能肉眼不可见；小概率中间槽有漏液，跑不下来。

很美，我是说景

 

@6137124507

可能原因：marker上方被挤压了，marker用样本的loading buffer稀释后再上样

做着做着怎么还艺术上了呢？

 

@外星小仔

可能原因：电泳问题，电泳温度过高，电泳过快，电泳槽老化

小学课本上写的一群大雁往南飞去了，今天让我给WB显出来了

抽象派

 

@赣医布布：条带没爆出来，神龙出来了

可能原因：无条带的可能原因较多，样本表达、制备或抗体选择使用、转膜封闭等不当都有可能造成无条带，需逐个排查。

神龙见首不见尾
高，实在是高

 

@挂面爱好者同好会

可能原因：浓度太大，降低上样量和抗体浓度

小朋友你是否有很多感叹号
或是问号？？？

 

@玫瑰歌剧 可能觉得我做的正确吧

可能原因：这个泳道有点漏胶吧

它真好，还不忘给你打√

 

@momo

可能原因：样本不均匀，浓缩胶浓缩不好。

这……是很多离心管？

 

笑着笑着就哭了派

@开栗：昨天跑的，还有点可爱

可能原因：样本浓度差异大或者盐浓度差异大。

可能它也觉得很无奈吧

 

@今天戒辣了没

可能原因：这是一个泳道还是两个泳道？一个泳道是样本不均匀，两个泳道是上样量高

一生万物？

 

@芝芝松果

可能原因：封闭奶粉的杂点吧

楼下在干嘛？

 

@momo

可能原因：样本浓度差异大或者盐浓度差异大

楼上，别看

有疑问访问优宁维WB产品页：https://www.univ-bio.com/sales-monthly-detail.html?id=205

这些翻车瞬间，看似搞笑，实则背后隐藏着WB实验的种种“坑”。从膜和抗体的选择，到孵育时间、电泳条件……每一个环节都可能成为翻车的“导火索”。WB实验的复杂性，让许多科研小白在实验过程中屡屡受挫，感觉每一步都是对的，结果却是错的。