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Features
- 为各种类型样本提供标准化的纯化方法
- 即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA
- 高品质DNA
- 经过优化的操作方法适合处理多种起始样本
- 可选择离心柱方式或96孔板高通量方式
Product Details
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅胶膜技术的离心柱或96孔板方式快速方便的纯化DNA。大多数样本可直接用蛋白酶K消化处理,无需机械破碎,减少了手动操作时间。为特殊样本提供优化的纯化方法,获得高重复性、高纯度的DNA,用于生物研究、基因型分析和兽医病理研究。DNA纯化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。
Performance
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能够从动物血液和组织样本中纯化大量的总DNA(参见下表和" DNA yields")。优化的实验方案可确保非标准样本的高产量,如动物毛发(参见" Genotyping of horses")和培养细胞、固定的组织,或者革兰氏阳性和阴性细菌。独特的在线实验方案参考文库,可从酵母、昆虫、毛发和其他类型样本中纯化DNA。
样本来源 | 样本量 | DNA(µg) |
---|---|---|
哺乳动物血液 | 100 µl | 3–6 |
鸟类血液 | 5 µl | 9–40 |
HeLa细胞 | 2 x 106 | 15–25 |
肝脏 | 25 mg | 10–30 |
脑 | 25 mg | 15–30 |
肾脏 | 25 mg | 15–30 |
脾脏 | 10 mg | 5–30 |
小鼠尾 | 1.2 cm(尾部) | 10–25 |
大鼠尾 | 0.6 cm(尾部) | 20–40 |
猪耳 | 25 mg | 10–30 |
马毛 | 10根毛发 | 2–4 |
鱼鳍 | 20 mg | 10–20 |
鱼卵(鲭鱼) | 10 mg | 5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits简化了从多种样本类型中纯化DNA的流程,包括在生命科学、兽医学和基因分型研究应用中常见的动物种类(参见" High-quality DNA")。纯化得到的DNA不含PCR抑制剂,能在标准多重(参见" Efficient 16plex PCR")real-time PCR(参见" Real-time PCR")中进行灵敏的检测。DNeasy Blood & Tissue Kits确保了可靠的实验结果,从转基因小鼠的实验室分析(参见" High-throughput purification")到家畜的育种项目(参见" Genotyping of pigs")和种系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地扩大常规的检测应用的规模。
See figures
Principle
DNeasy Blood & Tissue Kit适用于从不同的样本中,包括新鲜或冷冻的动物组织和细胞、血液或者细菌,快速纯化总DNA(如,基因组、线粒体和病原体等)。
DNeasy膜整合了硅胶膜的结合特性,经简单显微离心技术或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System处理即可。在高浓度离液盐的环境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中设计的缓冲液条件,旨在使DNA特异性吸附到硅胶膜上,并且优化去除污染物和酶抑制剂。
纯化过程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀,仅涉及少量手工步骤。这使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常适合同时处理多个样本。对于高通量的应用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能够同时处理96或192个样本。
Procedure
可靠的硅胶膜技术,利用便捷的离心柱或96孔板形式,确保了快速可重复的DNA纯化,不再需要有机抽提和乙醇沉淀(参见" DNeasy Mini and 96 procedures")。样本首先用蛋白酶K裂解。调整缓冲条件,以提供最佳的DNA结合条件并将裂解物上样到DNeasy Mini离心柱或DNeasy 96孔板上。在离心过程中,DNA选择性地结合到DNeasy膜上,污染物通过。余下的污染物和酶抑制剂将在两个高效的洗涤步骤中被去除。然后,用水或缓冲液将DNA洗脱,待用。
DNeasy Mini离心柱预装在收集管中,并且单独封存,确保方便和安全。使用DNeasy Mini离心柱的纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动进行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式进行高通量处理。
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Applications
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品质DNA,可直接用于多种下游分析,包括:
- 生命科学研究
- 家畜育种
- 种系基因分型研究
- 兽医病理分析研究
- 常规的应用检测