









Blue Native PAGE (BN-PAGE) 是一种从生物样品(质膜,胞浆等)中分离蛋白质复合物的电泳技术。能分离10kDa-10MkDa范围内的蛋白质以及蛋白质复合物。
BN-PAGE以考马斯亮蓝G-250代替SDS使蛋白质复合物带负电荷,根据各个不同复合物分子量不同从而在胶中得到分离。这些复合物在胶中以蓝色条带形式呈现。样品用一些温和的去污剂如 dodecylmaltoside (DM),Triton X-100和毛地黄皂苷 (digitonin)等溶解,从而使复合物以近似天然的状态分离。
实验中若想进一步分析复合物各个亚基的成分,通常采用BN-PAGE结合SDS-PAGE的方式。
基本信息:
胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1mm;
凝胶尺寸:宽×高×厚度为81×74×1.5mm;
Acr-Bis:29:1;
浓缩胶:4%,1.5cm;
凝胶厚度:1.5mm;
孔数:15孔;
最大上样量:30uL;
电泳液:Blue Native


1、阴极电泳液为abs90019;阳极电泳液为abs90020。
2、样品处理是整个实验的关键,样品处理最重要的是去污剂的浓度以及去污剂和蛋白的比例,这个通常需要摸索,设置不同的浓度以及比例,最后选择最佳的。
3、上样量不能太大,太大样品会沉积在上样孔中不能下来。上样量是根据上样孔的大小以及胶的厚度来决定。
4、样品的盐离子浓度要非常低,否则会导致样品在上样孔中沉积。如样品的盐离子浓度很高,首先必须脱盐。
5、每个孔上样的样品体积不能超过上样孔容积的4/5,所以必须控制样品的浓度,浓度太低需浓缩。
6、所有操作必须在冰上进行,保证复合物的完整性。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Glass gel 迷你预制胶兼容的电泳槽:
Glass gel系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽,包括
a. Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System);
b. Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280);
c. 北京六一 DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF;
d. 君意东方 JY-SCZ2+;
e. 天能 VE180;
或其它胶板宽度在10厘米的电泳槽。
在 Bio-Rad 电泳槽中的应用:
Bio-Rad Mini-PROTEAN系列电泳槽的U型密封条顶部有凸起结构,而Glass gel系列预制胶的短玻板是凹形结构,因此该部位是平的,电泳前需将具有凸起结构的密封条取出后反过来安装,是平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。另有厚度约为0.5mm的塑料垫片,请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。
a. 将Bio-Rad电泳槽中的U型密封条(如图绿色部分) 拉出,注意这时的密封条两端是有凸起的,凸起的这面为正面,无凸起的为反面。
b. 将密封条旋转180度(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液。
c. 放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。

1、凝胶4-8℃贮存,可以存放2个月。
2、请勿置于0℃以下,凝胶在0℃以下会冻凝,产生气泡和裂纹,凝胶报废。