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Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP ® Rabbit mAb

品牌： CST

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参数

分子量：

反应种属：

Human,Mouse,Rat,Monkey,

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产品介绍

产品信息

抗原名称

Histone H2A

来源纯化

使用与 Lys119 位点被单泛素化的人组蛋白 H2A 的羧基末端周围残基相对应的合成肽，，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

宿主

Rabbit

简单描述

Monoclonal Antibody for studying H2A.4 (Lys119) ubiquitinate. Cited in 319 publications. Validated for WB, IP, IF, F, ChIP, ChIP, C&T. Available in 2 sizes. Highly specific and rigorously validated in-house, Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit Monoclonal Antibody (CST #8240) is ready to ship.

商品描述

Product Usage Information

For optimal ChIP and ChIP seq results, use 5 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits. The CUT&Tag dilution was determined using 100,000 cells in a total reaction volume of 100 μl.

Application	Dilution
Western Blotting	1:2000
Immunoprecipitation	1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry)	1:800 - 1:1600
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)	1:800 - 1:3200
Chromatin IP	1:100
Chromatin IP-seq	1:100
CUT&Tag	1:50

分子量

研究领域

癌症,发育生物学与干细胞研究,表观遗传学,神经科学,

应用

反应种属

Human,Mouse,Rat,Monkey,

目标/特异性

Specificity/Sensitivity

仅当组蛋白 H2A 在 Lys119 位点被泛素化时，Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb 才能识别出内源水平的组蛋白 H2A。该抗体不与其他泛素化蛋白或游离泛素发生交叉反应。

物种反应性：

人, 小鼠, 大鼠, 猴

敏感性

Endogenous

背景

核小体由四个核心组蛋白（H2A、H2B、H3 和 H4）组成，是染色质的主要组成部分。最初被认为可作为 DNA 包装的静态支架的组蛋白现在已被证明是动态蛋白，可进行多种类型的翻译后修饰，包括乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化 (1)。泛素是一种保守的 76 氨基酸肽单元，能通过泛素化过程共价连接多个细胞蛋白。这个蛋白-泛素接合过程涉及三种组分。首先，泛素通过与激活组分 E1 形成一种硫酯复合体而被激活；激活的泛素继而转运到泛素载体蛋白 E2，然后从 E2 转运到泛素连接酶 E3，最后从 E3 转运到靶标蛋白赖氨酸残基的 ε-NH2 (2)。组蛋白 H2A 在 Lys119 位点被多梳阻遏蛋白复合体 1 (PRC1) 单泛素化，它对发育性 HOX 基因的转录沉默和 X 染色体失活十分关键 (3-6)。PRC1 由 Bmi1 和 RING1A（又称 RING1 或 RNF1）组成，这两种组分能增强催化亚基 RING1B（又称 RING2 或 RNF2）的 E3 泛素连接酶活性 (3,4)。组蛋白 H2A 还在 DNA 损伤的 Lys119 位点被单泛素化。除了另一种 E3 泛素连接酶 RNF8，这种单泛素化活动需要 PRC1 组分 Bmi1 和 RING1B，并且通过结合 RAP80/UIMC1（包含 1 个蛋白的泛素互作基序）促进随后的 BRCA1 复合体募集 (7-10)。 1.Peterson, C.L. and Laniel, M.A. (2004) Curr Biol 14, R546-51. 2.Liu, F. and Walters, K.J. (2010) Trends Biochem Sci 35, 352-60. 3.Wang, H. et al. (2004) Nature 431, 873-8. 4.Cao, R. et al. (2005) Mol Cell 20, 845-54. 5.de Napoles, M. et al. (2004) Dev Cell 7, 663-76. 6.Fang, J. et al. (2004) J Biol Chem 279, 52812-5. 7.Ginjala, V. et al. (2011) Mol Cell Biol 31, 1972-82. 8.Bergink, S. et al. (2006) Genes Dev 20, 1343-52. 9.Marteijn, J.A. et al. (2009) J Cell Biol 186, 835-47. 10.Wu, J. et al. (2009) Mol Cell Biol 29, 849-60.

研究领域

癌症,发育生物学与干细胞研究,表观遗传学,神经科学,

翻译后修饰

Ubiquitinate

制备和贮存

保存方式

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #45772.

数据库链接

Entrez-Gene ID

221613

UniProt ID

Q96QV6

参考图片

Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from 4 x 106 NCCIT cells and either 10 µl of Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb or 2 µl of Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using human HoxA1 intron 1 primers, SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517, SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin (equivalent to one).

使用SimpleChIP®Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，来自4 x 106 NCCIT细胞的交联染色质以及10 µl Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb或2 µl Normal Rabbit IgG #2729进行染色质免疫沉淀实验。使用human HoxA1 intron 1 primers、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517、SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516和SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，浓缩的DNA通过real-time PCR定量。在每个样品中免疫沉淀DNA的数量被当做一个相对于总input chromatin的数量的信号（这相当于一）。

Western blot analysis of extracts from various cell lines using Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb.

使用Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb兔单抗，免疫印迹(Western blot)分析不同细胞系中Histone H2A的蛋白水平。

Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells using Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb (green) and COX IV (4D11-B3-E8) Mouse mAb #11967 (red).

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