小鼠肝脏组织解离试剂盒

需自备试剂、耗材、器械与仪器：
试剂：细胞培养基，红细胞裂解液（选用）
耗材：离心管，一次性无菌过滤器（70um）
器械: 眼科剪、眼科镊
仪器：恒温摇床，离心机
操作步骤：
1. 取新鲜小鼠肝脏组织 100mg 左右加至无菌离心管中，用眼科剪将组织彻底剪碎至 1-2mm³ ，加入小鼠肝脏组织解离液 1mL。
2. 将离心管置于恒温摇床上，37℃/180rpm 震荡孵育30-40min消化组织，解离结束后观察样本状态，糜烂状态即可，如若还是团块儿可适当延长时间。
3. 孵育结束后将离心管内的组织匀浆用 70um 无菌过滤器过滤，然后加入细胞培养基冲洗无菌过滤器，用 50mL的离心管收集滤液。
4. 将细胞悬液 1200rpm 离心 5min ，弃上清。
5. 再加入适量培养基，1200rpm 离心 5min，弃上清。
6. 用细胞培养基重悬细胞，取少量细胞镜下观察消化情况。
7. 根据需要将细胞用于后续实验。
8. （可选）可使用红细胞裂解液去除组织解离过程中的红细胞。

适用于小鼠肝脏组织的解离

1. 小鼠肝脏组织解离试剂可根据实际使用量进行分装，置于-20℃保存，随用随取，避免反复冻融。
2. 小鼠肝脏组织解离试剂 2-8℃保存应不超过 48h, 2-8℃长时间保存会降低产品的解离效果。
3. 若组织解离获取的细胞用于细胞培养，应保证所有操作均在无菌条件下完成。