Ni-NTA Agarose (25 ml)

• 从粗裂解物中一步纯化出纯度大于 95% 的蛋白
• 高结合亲和力和高容量
• 非变形或变性条件下的纯化选择
• 预充即用型基质，适用于任何规模的纯化
• 自动纯化和检测方案

Ni-NTA Agarose 是一种亲和层析基质，用于纯化带有 His 标签的重组蛋白。His 标签中的组氨酸残基凭借高特异性和亲和力，与固定镍离子配位球中的空位结合。澄清的细胞裂解物被加载到基质上。His 标签蛋白与基质结合，其他蛋白则穿过基质。洗涤后，在非变性或变性条件下在缓冲液中洗脱 His 标签蛋白。

Ni-NTA Agarose 将 Ni-NTA 与 Sepharose CL-6B 支链耦合在一起，具有高结合能力，非特异性结合极少（见图 原生条件下一步纯化）。这种材料具有出色的处理性能，适用于大多数规模的间歇式和柱式纯化。Ni-NTA Agarose 既可单独提供，也可作为 QIAexpress Kits 的组成部分提供，这些试剂盒是用于从大肠杆菌中高效表达和纯化 His 标签蛋白的全套试剂盒。

QIAexpress Ni-NTA 蛋白纯化系统基于的是获得专利的 Ni-NTA（次氮基三乙酸镍）树脂对含有六个或更多组氨酸残基（连续或交替）的亲和标记（His 标记）的蛋白的显著选择性。该技术可在非变性或变性条件下，从任何表达系统中一步纯化几乎所有 His 标签蛋白。NTA 有四个镍离子螯合位点，与只有三个位点可与金属离子相互作用的金属螯合纯化系统相比，NTA 与镍的结合更紧密。额外的螯合位点可防止镍离子浸出，与其他金属螯合纯化系统相比，它的结合能力更强，制备的蛋白纯度更高。QIAexpress 系统可用于从任何表达系统中纯化 His 标签蛋白，包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌。

Ni-NTA 基质能可靠地一步纯化适用于以下任何应用的 His 标签蛋白：

• 结构和功能研究
• 结晶以确定三维结构
• 蛋白间和蛋白与 DNA 之间相互作用检测
• 通过免疫接种产生抗体
• 将纯化规模扩大到生产规模