









第一链cDNA合成预混液是以mRNA或者总RNA为模板,高效合成第一链cDNA。本产品含有反转录反应所需的全部试剂(Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,Oligo(dT)18,Random N6,dNTPs)。反应时只需要加入RNA模板和水即可,操作简单,降低操作过程中的污染。本制品含有去基因组成分gDNA Purge,以RNA为模板进行cDNA第一链合成时,只需一步操作,可以同步去除基因组DNA污染,反应结束后,85℃加热5秒钟,就可以失活逆转录酶,RNA酶抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR或荧光定量PCR的模板,第二链cDNA的合成或线性RNA扩增,也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。
另外,本产品提供了Plus No RT Control,用于配制无逆转录酶对照反应,检验RNA模板中是存在基因组DNA残留。
产品特点:
本制品采用耐高温逆转录酶,大幅度提高了热稳定性和cDNA合成效率。
本制品中添加的NovoScript Reverse Transcriptase无RNase H活性,可避免第一链cDNA合成过程中,RNA/DNA杂交模板链中RNA降解,保证cDNA合成的质量。
本制品中Random N6和Oligo(dT)18引物比例经过优化,可均匀合成样品中的cDNA。
本制品中含有去基因组成分,逆转录时可同步去除基因组DNA污染。
产品组分:
产品组成 | 50次(20ul体系) | 100次(20ul体系) |
2×Plus 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix | 500ul | 1ml |
gDNA Purge | 50ul | 100ul |
2×Plus No RT Control | 50ul | 100ul |
RNase Free Water | 1ml | 1ml×2 |

2、确保所用试剂中无RNA酶污染。
3、试剂盒要严格密封保存。在反转录过程中,所有管子要确保扣严。
4、纯化过的RNA必须保证不含有盐,金属离子,乙醇和苯酚,以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
5、为保证反转录反应的有效进行,需使用高质量的RNA模板。
6、当模板含量较低或后续PCR扩增片段过长时可以适当延长逆转录时间。
7、2×Plus 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix、gDNA Purge及2×Plus No RT Control 含有甘油,使用前请充分混匀后并短暂离心收集至管底再进行使用。
