









组分 | UA070076-50 Rxns | UA070076-250 Rxns |
StartScript II Reaction Mix (2X) | 600 μl | 5 x 600 μl |
StartScript II Enzyme Mix (10X) | 100 μl | 5 x 100 μl |
Random Primer Mix (60 μM)
| 110 μl | 5 x110 μl |
Oligo(dT)23 VN* (50 μM) | 110 μl | 5 x 110 μl |
RNase Free dH2O | 1 ml | 5 x 1 ml |
* V = A, G or C; N = A, G, C or T

StartScript II cDNA 第一链合成试剂盒含有两种经过优化的混合液:StartScript II 酶混合液和 StartScript II 反应混合液。酶混合液含 StartScript II 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂;反应混合液含 dNTP 和经优化的缓冲液。StartScript II 反转录酶是重组 M-MLV 反转录酶,降低了 RNase H 活性且提高了热稳定性。与野生型 M-MLV 反转录酶相比,StartScript II 反转录酶可在更高的温度下合成第一链 cDNA。该酶的活性温度高达 48℃,且具有特异性高、cDNA 产量高的特点。
该试剂盒还提供两种经优化的反转录引物与无核酸酶水污染的水。Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 能与 poly(A) 尾的起始端退火。经优化的随机引物混合液能随机并持续性地与整个 RNA 模板配对,包括 mRNA 与无 poly(A) 尾的 RNA。合成的第一链 cDNA 产物长度可达 10kb。

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[1] Roth, M J , N. Tanese , and S. P. Goff . "Purification and characterization of murine retroviral reverse transcriptase expressed in Escherichia coli. " Journal of Biological Chemistry 260.16(1985):9326.
[2] Kotewicz, Michael L , et al. "Isolation of cloned Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase lacking ribonuclease H activity." Nucleic Acids Research 16.1(1988):265-277.
