一步法细菌活性蛋白提取试剂盒

1、本产品可以从刚收集的细菌或冻存的细菌中提取蛋白，但从冻存的细菌提取效率会相对更高，本试剂从蛋白缺陷的BL21等几种常用的细菌中提取可溶性蛋白的效率较高，如果对于某些细菌的裂解效率不高,可以在提取前反复冻溶1~2次以提高提取效率。
2、本产品只提供PMSF丝氨酸蛋白酶抑制剂，如果需要请购买我司生产的蛋白酶抑制剂混合物，EDTA也可以加入到提取试剂中，终浓度为5mM，但是它会抑制DNase I的消化作用，同时也会破坏NI-NTA树脂，所以加入时要根据下游实验的要求作出选择。
3、加入Lysozyme和DNase I到提取试剂，可以提高蛋白质的提取效率，但是对于表达的蛋白分子量小于60k,而且全是可以溶解的，可以不加Lysozyme和DNase I。对于加入Lysozyme和DNase I会影响下游操作时，也尽量不要加。
4、对于形成的包涵体蛋白，可以使用我司生产的包涵体溶解液溶解及后续纯化。
5、如需要，请在实验前在抽提试剂中加入1倍浓度的我司生产的磷酸酶抑制试，再进行细菌活性蛋白质的提取。
6、提取试剂在低温下容易起雾，请恢复至室温后再使用。
7、可以使用Sephadex重力型脱盐柱脱盐或将缓冲液替换为所需要的目的蛋白质合适缓冲液。
8、对于提取的蛋白质，可以采用我公司生产的改良型BCA法蛋白浓度定量试剂盒或非干扰型蛋白质浓度定量试剂盒或改良型Lowry法蛋白质浓度定量试剂盒对提取样品中的蛋白质进行定量。
9、如果用于蛋白质质谱研究，请用我司生产的铜染或锌染或质谱用快速银染试剂盒对胶上的蛋白质进行染色，这些染色方法对蛋白质没有修饰作用，所以对质谱图没有影响。对于一般的染色，可以采用无毒型考马氏亮蓝染色液或高灵敏考马氏亮蓝染色液进行染色。
10、产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
11、使用后，请旋紧瓶盖防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
12、本试剂盒只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果，概不承担责任。