品牌： Absin
下载产品说明书
用小程序，查商品更便捷
收藏
对比
咨询
产品介绍
产品信息
商品描述
PspGI (EcoRII) 快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。所有快速内切酶在通用的 CutOne 或 CutOne ColorBuffer 中都具有优良的活性，能够在 5~15 分钟内完成酶切。此外，去磷酸化、连接试剂在 CutOne Buffer 中均具有 100% 活性，支持一管化反应，提升“酶切 - 修饰 - 连接”的体验。CutOne Color Buffer 包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。CutOne Color Buffer 的红色染料与 2500 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与 10 bp双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
识别位点：
5'... ↑ C C W G G ...3'
3'... G G W C C ↑ ...5'
建议反应条件：
1× CutOne缓冲液；
75℃温育；
参照“DNA 快速酶切流程”配制反应体系。
失活条件：
不可热失活，请使用酚氯仿抽提或柱纯化。
甲基化敏感性：
对于被 Dcm 甲基化的 DNA，剪切可能受阻。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| PspGI | 200 μl |
| 10× CutOne Buffer | 2×1 ml |
| 10× CutOne Color Buffer | 2×1 ml |
背景
技术指标
质量控制：
功能活性检测：
75℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反应体系中，1 μl PspGI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA (Dcm-)。
超长时间温育检测：
75℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反应体系中，将 1 μl PspGI 与 1 μg λDNA (Dcm-) 共同温育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。更长时间酶切可能出现星号活性。
酶切 - 连接 - 再酶切检测：
75℃下，使用 10 倍酶量的 PspGI 消化 DNA 底物，回收酶切产物，在 22℃下使用 T4 DNA Ligase (Fast) 可以将超过95% 的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开 95% 以上的连接产物。
非特异性内切酶活性检测：
37℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反应体系中将 1 μl PspGI 与 1 μg 超螺旋质粒 DNA 共同温育 4 h 后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于 10% 的质粒 DNA 转变成缺刻或线性状态。
功能活性检测：
75℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反应体系中，1 μl PspGI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA (Dcm-)。
超长时间温育检测：
75℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反应体系中，将 1 μl PspGI 与 1 μg λDNA (Dcm-) 共同温育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。更长时间酶切可能出现星号活性。
酶切 - 连接 - 再酶切检测：
75℃下，使用 10 倍酶量的 PspGI 消化 DNA 底物，回收酶切产物，在 22℃下使用 T4 DNA Ligase (Fast) 可以将超过95% 的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开 95% 以上的连接产物。
非特异性内切酶活性检测：
37℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反应体系中将 1 μl PspGI 与 1 μg 超螺旋质粒 DNA 共同温育 4 h 后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于 10% 的质粒 DNA 转变成缺刻或线性状态。
制备和贮存
保存方式
-20°C 及以下运输及保存，长期保存建议放-80°C 。有效期2年。
声明 ：本官网所有报价均为常温或者蓝冰运输价格，如有产品需要干冰运输，需另外加收干冰运输费。
危险品化学品经营许可证(不带存储) 许可证编号：沪(杨)应急管危经许[2022]202944(QY) 
营业执照(三证合一)