








Performance
使用QIAEX II Gel Extraction Kit可高效回收获得10 ng到10 µg DNA(参见"Consistent recovery")。使用30 µl的QIAEX II悬浮液,多功能的批处理程序使结合能力很容易达到15 µg的DNA。
QIAEX II Gel Extraction Kit应用硅颗粒纯化DNA片段(40 bp–50 kb),回收率可达60–95%。10 µl QIAEX II悬浮液可结合至多5 µg的DNA,后续洗脱液只需20 µl。
DNA大小 | 回收率,百分比* |
---|---|
44 bp | 75 |
75 bp | 75 |
500 bp | 95 |
7.5 kb | 85 |
23.5 kb | 75 |
48.5 kb | 60 |
Principle
使用QIAEX II体系纯化DNA片段的基本条件是,在离液盐存在的情况下,琼脂糖处于溶解状态,并且核酸可选择性的吸附到QIAEX II硅胶颗粒上。QIAEX II可从盐、琼脂糖、聚丙烯酰胺、染料、蛋白质和核酸中纯化DNA,无需苯酚提取或乙醇沉淀。QIAEX II对TAE和TBE缓冲液中的多种琼脂糖都有效。
QIAEX II颗粒确保高效回收DNA,且不被剪切,大片段的DNA也不例外。碘化钠是一种不容易从DNA样本中去除,还会影响后续反应的物质,优化的缓冲液可使回收的DNA中不含碘化钠。
QIAEX II体系使用的溶解和结合缓冲液包含一种特殊的pH指示剂。简单的颜色变化即可指示结合混合液的最佳pH值,确保DNA有效吸附到QIAEX II硅胶颗粒(参见"pH indicator dye")。有色染料也容易辨别结合混合液中未溶解的琼脂糖,确保完全溶解,获得最大的DNA产量。
Procedure
QIAEX II硅胶颗粒加入到溶解的凝胶碎片中,颗粒通过简单的离心操作收集(参见"QIAEX II procedure")。洗涤后,纯DNA用20 µl Tris缓冲液或水洗脱。
QIAEX II Gel Extraction Kit包括QIAEX II Suspension,结合和洗脱缓冲液,以及一本全面的手册。QIAEX II Suspension也可单独购买。有从琼脂糖凝胶、溶液和聚丙烯酰胺凝胶中纯化DNA的实验方案。
Applications
QIAEX II体系纯化得到的DNA可即用于多种应用,包括:
- 限制性酶切
- 标记
- 连接
- PCR

