QIAseq Library Quant Assay Kit

• 以芯片规格提供预分装的即用型、梯度稀释DNA标准品
• 自动计算文库浓度
• 实验方案简便、灵敏度高、动态范围宽
• 与Illumina和Ion Torrent/Proton NGS平台兼容
• 与多数qPCR仪兼容

准确定量文库对于NGS平台的高效使用十分重要。但是，当前的分光广度法只能检测总核酸浓度。GeneRead Library Quant System则采用real-time PCR技术，仅定量检测两端有接头的DNA分子。只有两端有接头的DNA分子才能在乳液PCR（Ion Torrent）或桥式PCR（Illumina）中得到扩增，因此此方法能够准确定量检测可扩增的文库DNA。real-time PCR灵敏性高，能够定量检测低浓度文库，甚至是浓度低于传统分光光度法的检测阈限。

GeneRead Library Quant System提供管装和芯片规格，经过优化，适合配合GeneRead qPCR SYBR Green Mastermixes使用，具有出色的灵敏性和宽泛的动态范围。两种规格都提供适合Illumina或Ion Torrent平台的DNA标准品。芯片规格提供分装的5个浓度的10倍梯度稀释标准品，混合有PCR引物，一式三份。确保您的样本文库在检测范围之中（参见 Principle of GeneRead Library Quant System）。

芯片工作流程（参见 GeneRead Library Quant Array workflow）使用两个10倍稀释的样本文库，确保其浓度在梯度稀释的DNA标准品检测范围内。将样本与Generead qPCR SYBR Green Mastermix混合，等分为三份，加入芯片中。进行PCR，将原始C_T数据导出至提供的数据分析Excel文件中，进行文库浓度的自动计算（Illumina）或模板稀释因子计算（Ion Torrent/Proton）。

管装标准品的工作流程与芯片的工作流程相似，仅有少数不同。先制备5个10倍梯度稀释的DNA标准品，以及2个10倍梯度稀释的样本文库。这样可确保文库的浓度在标准品稀释液范围之内。下一步，将稀释的DNA标准品和样本文库与提供能够的PCR试剂和相应的GeneRead qPCR SYBR Green Mastermix混合。进行PCR，将原始C_T数据导出至提供的数据分析Excel文件中，进行文库浓度的自动计算（Illumina）或模板稀释因子计算（Ion Torrent/Proton）。