RIPA裂解液(强)

RIPA裂解液(强)

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            RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer),本意为 Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对组织和细胞都有较好的裂解作用。RIPA 的配方有很多种,根据其裂解强度的不同,大致可分为强、 中、弱三类,应用上会有一些差异。
            本品为裂解性较强的 1×RIPA 裂解液,主要成分为 50mM Tris-HCl (pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% 脱氧胆酸钠,0.1% SDS,以及正钒酸钠,氟化钠,EDTA 和抑肽酶等多种抑制剂,可广谱且有效抑制蛋白 降解,经本品裂解所得的蛋白样品,适用于蛋白免疫印迹(Western Blot),免疫沉淀(IP),和免疫共沉淀(Co-IP)等实验。经本品裂解收集的蛋白样品,可使用增强型 BCA 蛋白浓度测定试剂盒 测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的去垢剂,不适合用 Bradford 法来测定总蛋白浓度。
    产品组分

    组分名称规格
    ARIPA Lysis Buffer (Strong)100ml
    BPMSF(100mM)1.5ml
    外观
    溶液
    应用
    注意事项
    1、去除贴壁细胞的培养液时,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。
    2、如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
    3、如果细胞量较多,必须分装成 50~100 万细胞/离心管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
    4、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 Vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
    5、溶解 RIPA 裂解液时,应尽量缩短溶解时间,避免裂解液中的有效成分失效。
    6、裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NF-KB、p53 等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
    7、细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或 4℃进行。
    8、为了您的安全和健康,请穿戴好个人防护装备和服装进行操作。
    制备和贮存
    保存方式
    -20℃保存,有效期12个月。避免反复冻融,建议分装储存。

    参考图片

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    货号:
    abs9229-100ml
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