RNA酶抑制剂

RNase 抑制剂是从大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源 RNase 抑制剂，它通过非共价键方式 1:1 与 RNase A、B 或 C 结合，从而抑制三种酶的活性，保护 RNA 不被降解。但对核糖核酸酶 1、核糖核酸酶 T1、S1 核酸酶、核糖核酸酶 H 和曲霉来源核糖核酸酶无效。RNase 抑制剂 经过 RT-PCR、RT-qPCR、IVT-mRNA 检验，能与各类商业化逆转录酶、各种 DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶兼容。 与人源 RNase 抑制剂相比，鼠源 RNase 抑制 剂不含两个对氧化非常敏感的半胱氨酸，因而具有更高的抗氧化性，使其在低浓度 DTT（小于 1 mM）下稳定。该特征使其适合用于不能添加高浓度 DTT 的反应（例如 Real-time RT-PCR）。

≥90%

1、剧烈振荡或搅拌会导致酶失活；
2、抑制剂的活性温度为 25~55ºC，温度 ≥65ºC 失活；
3、不抑制 RNase H、RNase 1 及 RNase T1 活性；
4、抑制 RNase 活性的 pH 范围较广（pH 5-9 均有活性），在 pH 7-8 时表现最大活性。

储存缓冲液
50 mM KCl, 20 mM HEPES-KOH (pH 7.6@ 25°C), 8 mM DTT and 50% glycerol.
活性定义
抑制 5 ng RNase A 活性的 50%所需要的酶量定义为 1 个活性单位（U）。
质量控制
（1）核酸外切酶活性：40 U的本品和1 μg λ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 16 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；
（2）核酸内切酶活性：40 U 的本品和 1 μg λDNA 在 37℃下反应 16 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；
（3）切口酶活性：40 U 的本品和 1 μg pBR322 在 37℃下反应 16 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；
（4）RNase 活性：40 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下反应 4 小时，电泳谱带不发生变化；
（5）大肠杆菌 DNA 残留检测：40 U 本品中残留的核酸经 E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqMan qPCR检测，E.coli基因组残留≤ 0.1 pg/ 40 U。
（6）细菌内毒素（Endotoxin）：LAL-Test，中国药典 2020 版第四部凝胶限度试验法 通则（1143），细菌内毒素含量≤10 EU/mg。